Toll样受体3过表达与抑制表达对草鱼呼肠孤病毒致病的影响及机理研究

由草鱼呼肠孤病毒（GCRV）引起的草鱼出血病给水产养殖业造成了巨大损失。前期研究发现，GCRV感染后，双链RNA的模式识别受体- - Toll样受体3（TLR3）基因在多个组织中表达显著上调。为了阐明TLR3的表达对GCRV致病的影响，本项目拟构建CMV启动子驱动TLR3、shTLR3、反义TLR3以及CMV-U6启动子驱动shTLR3的系列表达载体，通过显微注射法，获得TLR3不同表达水平的转基因鱼。在GCRV攻毒后，对抗病毒效果最佳的组别传至F2代，建立家系，GCRV感染，用电镜、石蜡切片技术进行病理研究，用实时荧光定量RT-PCR监测TLR3、Mx、PKZ、RIG-I、MDA5、Dicer、Argonaute 2等抗病毒免疫相关基因的表达变化及病毒数量。本课题的实施将对鱼类TLR3功能的研究具有重要意义，对鱼类抗病毒免疫机理的阐述具有重要价值，为草鱼出血病抗病育种奠定基础。