基于体内过程的苗药隔山消抗功能性消化不良药效物质基础研究

Cynanchum Auriculatun is a traditional chinese medicine, which widely used by the Miao nationality in Guizhou for digestive system disease and has strong resource advantages. However, the further research and development of the herb has come to the bottleneck, because its pharmacodynamics material basis is unkown. Based on the previous systematic research of chemical components, pharmacological action and active ingredicnts, we found acetophenones and coumarins extracted from effective components of C Auriculatun have anti- Functional Dyspepsia effect. The project will focus on the direct bioactive substance discovered by RAW264.7 cell inflammatory model, colorectal contraction model in vitro, and functional dyspepsia (FD) model rats. According constiuents migrating into the blood analyzed by UPLC-DAD-MS/MS and UPLC-Q/TOF-MS , the spectrum-activity study and relationship(PK-PD) between migration in vivo and pharmacological effects (changes of brain-gut peptide and inflammatory mediators) will be explored . Furthermore, through the study of absorption, distribution, metabolism, excretion (ADME),the mechanism of absorption and its metabolic pathway in vivo of active components will be found. The work will help finding out the therapeutic material basis in the herb，and lay a scientific foundation for deep development and application of the medicinal plant C. Auriculatun.

隔山消为贵州苗族治疗消化系统疾病的常用药物，有较强区域特色资源优势，但有关隔山消药效物质基础研究尚属空白，已成为深层次开发利用的瓶颈。课题组前期对隔山消化学成分、药理作用、活性组分等进行了研究，从隔山消活性组分中分离得到的苯乙酮类和香豆素类化合物具有明显的抗功能性消化不良活性。本课题将在前期工作基础上，从基于RAW264.7细胞炎症模型、离体肠管收缩模型和功能性消化不良（FD）模型大鼠体内的直接作用物质出发，以UPLC-DAD-MS/MS、UPLC-Q/TOF-MS等技术分析隔山消入血成分，探讨隔山消谱效关系及体内移行成分与药理效应（脑肠肽和炎症介质改变）的相关性（PK-PD模型）；并通过体内吸收、分布、代谢、排泄（ADME）研究，明确隔山消活性成分在体内的吸收机制及其代谢途径。以期阐明隔山消抗FD作用的物质，为隔山消开发利用奠定基础。

隔山消为贵州少数民族常用药物，用于消化道疾病的治疗，但由于隔山消药效物质及体内过程研究尚属空白，质量控制水平较低，制约了隔山消的深层次开发利用。本项目对隔山消提取物进行了化学成分分析，共鉴定了21个化合物。从灌胃给予隔山消提取物的大鼠含药血浆中分析发现体内39 个移行成分（原型成分14 个），且含药血浆能显著促进离体十二指肠的收缩，具有拟抗FD作用；谱效关系分析显示，有16个特征峰与十二指肠收缩最大张力指标有显著关联，其中包括6个原型成分，分别为丁香酸、去酰基萝藦苷元、阿魏酸、东莨菪内酯、白首乌二苯酮和青阳参苷元。在建立功能性消化不良模型大鼠的基础上，进一步对其中的4个活性成分开展药动学和体内过程研究，与正常组相比，白首乌二苯酮、去酰基萝藦苷元和青阳参苷元的体内吸收降低，代谢减慢；丁香酸吸收增加，代谢减慢。在此基础上，结合各药效指标的动态变化规律，建立了隔山消PK-PD结合模型，量化了隔山消药动指标成分PK与PD之间的关联，阐明了隔山消抗FD的作用可能与提高FD大鼠血浆中5-HT、MTL、GAS的含量及降低TNF-α的含量有关，而白首乌二苯酮可能作用于TNF-α，去酰基萝藦苷元可能作用于MTL和TNF-α，青阳参苷元和丁香酸可能作用于5-HT、MTL和GAS来发挥药效。体内过程结果表明，上述4个活性成分均可吸收进入肠道，并呈现主动转运、被动扩散等多种吸收特征，胆汁均会抑制4个成分的吸收。4个成分可迅速分布至各组织脏器中，于10 min或30 min在大鼠各组织中达到含量峰值，不存在较长时间的蓄积现象，基本在4小时内清除完毕。除白首乌二苯酮在体内主要分布于肺组织外，其他3个成分均主要分布于胃、肠中。通过对隔山消进行代谢物检测，尿液、粪便、胆汁分别有94、85、37个代谢产物（含交叉成分），其中胆汁中未检测出丁香酸的原型成分。其余3个成分经尿液、粪便及胆汁的排泄量较少，白首乌二苯酮、青阳参苷元累积排泄量不足给药量的3%，去酰基罗摩苷元不足给药量的8%。最后，成功建立了同时测定这4个成分的多指标质量控制方法，同时建立了16批次药材的指纹图谱，标定共有峰29个，指纹图谱相似度为0.723～0.998。上述研究结果为隔山消创新药物研制及药材资源深度开发提供了科学依据。