MSCs移植对化疗导致卵巢功能损害的治疗及六味地黄丸协同作用的研究

化疗所引起的卵巢功能损害而导致的早绝经和不孕影响了女性患者的生存质量。在治疗疾病的同时能够保留生育功能、生理功能，是女性恶性肿瘤患者迫切希望解决的问题。国外近期研究成果显示，性腺外成体干细胞可以向卵母细胞的分化，提示我们从性腺外成体干细胞中获得生殖细胞的希望。本项目在成功对骨髓间充质干细胞进行分离、培养、诱导的基础上，运用现代细胞培养方法、分子生物学等相关技术，旨在研究：1）骨髓间充质干细胞对化疗后卵巢功能损害的修复作用；2）六味地黄丸是否可协同骨髓间充质干细胞移植，增强对化疗后卵巢功能损害的修复，减少干细胞移植所引起的免疫排斥反应。将我国传统中药制剂六味地黄丸的使用与基因工程、组织工程相结合，进一步探讨"肾主生殖"的理论实质，是中医药走向现代化的一个切入点，填补目前中医药在防护化疗引起的卵巢功能损害方面的空白。

化疗所引起的卵巢功能损害而导致的早绝经和不孕影响了女性患者的生存质量。在治疗疾病的同时能够保留生育功能是女性恶性肿瘤患者迫切希望解决的问题。国外近期研究成果显示，性腺外成体干细胞可以向卵母细胞的分化，提示我们从性腺外成体干细胞中获得生殖细胞的希望。本项目在成功对骨髓间充质干细胞进行分离、培养、诱导的基础上，运用现代细胞培养方法、分子生物学等相关技术，探讨干细胞移植结合中药灌胃对卵巢早衰大鼠生殖内分泌及卵巢颗粒细胞凋亡的影响。结果显示应用干细胞移植方法，可使卵巢早衰大鼠FSH下降，E2升高；HE染色结果显示原始卵泡、窦前卵泡、窦状卵泡、成熟卵泡及黄体数量均增加，而闭锁卵泡数量降低，但尚未达到青年对照组水平，其中MSCs+herb组疗效优于MSCs+N.S组。Elisa法检测结果显示，两治疗组的TNF-α、AoAb 均较模型组有所下降，但尚未达到青年对照组水平，其中以MSCs+herb组下降较明显；IFN-γ在模型组与青年对照组含量差异不明显，但干细胞移植后，尤其MSCs+N.S组IFN-γ明显升高。Western-blot结果显示，两用药组的ERmRNA、PR mRNA表达均明显上升，与模型组比较差异有显著性意义；Bax mRNA表达下降，Bcl-2 mRNA表达上升，提示干细胞移植后可延缓卵巢颗粒细胞凋亡，其中以MSCs+herb组效果显著。上述结果显示，干细胞移植后可改善卵巢早衰大鼠生殖内分泌状况，延缓卵巢颗粒细胞凋亡，达到治疗卵巢早衰的目的。加用中药后，可以增加干细胞在卵巢的归巢率，起到靶向引导作用。同时，中药可以减低干细胞移植所引起的免疫排斥作用，提示我们应用干细胞移植联合中药，共同作用来达到防止卵巢早衰疾病的目的。