HABP1 分子靶点成像：乳腺癌及卵巢癌精准诊疗新路径

The role of molecular target imaging in the accurate diagnosis and treatment of breast cancer and ovarian cancer become more and more significiant,therefor, for a specific target of new diagnostic and therapeutic probes need an urgent development. Hyaluronic acid binding protein 1 (HABP1) is an important proteoglycan in the extra-cellular matrix,over expression of HABP1 plays an crucial role in the beginning, progression and metastasis of breast and ovarian cancer. Therefore, it is not only an important element in treatment and prognosis evaluation but also a crucial target in the study.At present,the diagnosis methods of HABP1 expression are mainly in vitro.In this study, HABP1 was used as a target, and 99mTc-labeled HABP1 small interfering RNA (siRNA) was used to synthesize highly specific siRNA molecular probes.And through a series of in vivo and in vitro studies,explore the feasibility of the molecular probes in a tumor-burdened nude mice model of imaging,and the expression of HABP1 gene evaluated on a living tumor model.Emphatically,it should analyze the probe aggregation degree correlation with HABP1 expression in tumor.Furthermore,the HABP1 molecular target imaging was applied in the study of radiotherapy and chemotherapy sensitivity tumor models in order to evaluate its clinical value.This subject is expected to provide a new pathway for the accurate diagnosis and treatment of breast cancer and ovarian cancer,and have a good clinical application prospect.

分子靶点成像在乳腺癌及卵巢癌精准诊疗中的重要作用日益彰显，因此针对特定靶点的新型诊疗探针亟待研发。透明质酸结合蛋白1（HABP1）是细胞外基质中重要的蛋白多糖，其过度表达在乳腺癌和卵巢癌的发生、发展及转移过程中起重要作用，因此是治疗及预后评价的重要因子和研究的重要靶点。目前，针对HABP1表达情况的诊断方法主要在体外。针对此现状，本课题将以HABP1为靶点，用核素99mTc标记HABP1小干扰RNA（siRNA）合成高特异性siRNA分子探针，通过一系列体内、体外研究探讨分子探针在荷瘤裸鼠模型显像的可行性，在活体肿瘤模型上评估HABP1基因表达量，着重分析该探针在肿瘤内聚集程度与HABP1表达相关性。进一步把HABP1分子靶点成像应用于肿瘤模型的放化疗敏感性研究以评价其临床价值。本课题有望为乳腺癌、卵巢癌精准诊疗提供一个新路径，有良好的临床应用前景。

项目背景：乳腺癌（Breast cancer,BCa）及卵巢癌（Ovarian cancer，OCa）是女性最常见的妇科癌症之一，5年生存率较低。评估透明质酸结合蛋白1（HABP1）水平可为乳腺癌及卵巢癌的诊断和治疗提供重要信息。在本研究中，我们设计了一种基于 99mTc 放射性标记的小干扰 RNA (siRNA) 的新型 HABP1 探针，用于在体内无创检测 HABP1 的表达，从而为其诊断和治疗提供新的方法。.研究内容：内容上总体分为五大部分：（1）细胞在蛋白及mRNA水平的筛选；（2）分子探针的合成及质控；（3）分子探针小鼠活体成像、生物分布；（4）探讨分子探针在肿瘤内聚集量与肿瘤表达HABP1程度相关性；（5）分析HABP1表达程度在体外实验中对乳腺癌及卵巢癌细胞化疗的影响。.重要结果：（1）分子探针具有良好的稳定性、标记率及放化纯；（2）分子探针可以在乳腺癌、卵巢癌荷瘤裸鼠上实现肿瘤的 SPECT 显像，且生物分布显示该分子探针通过通过主要肝肾代谢；（3）结果证明高表达HABP1可增加乳腺癌及卵巢癌细胞的顺铂化疗耐药性，对紫杉醇的化疗耐药性影响则不显著。 .关键数据：（1）Western-blot及RT-PCR均显示HABP1分子探针仍能够明显抑制乳腺癌及卵巢癌的HABP1蛋白及mRNA的表达（P<0.01，n=3）；（2）分子探针标记率为 61.92%±2.52%（n=3），放化纯度>90%；（3）分子探针 SPECT 显像，注射后 2 小时，MDA-MB-231细胞系裸鼠99mTc-SHNH-siRNA 789分子探针组的 T/M 比值为 2.724±0.356（n=5），HO8910细胞系裸鼠99mTc-SHNH-siRNA 789分子探针组的 T/M 比值为3 .125±0.267（n=5），且都显示出良好的肝肾代谢能力；（4）HO8910卵巢癌肿瘤在6h达到2.32± 0.24％% ID/g；（5）高表达HABP1可增加卵巢癌细胞的顺铂化疗耐药性，且具有统计学意义（P<0.05），对紫杉醇的化疗耐药性影响则不显著。 .科学意义：本课题成功合成了 99mTc 标记 HABP1 siRNA的分子探针，并分别验证了其在荷瘤裸鼠乳腺癌及卵巢癌上的显像效果，初步探讨99mTc-HABP1-siRNA 在乳腺癌及卵巢癌诊疗一体化中的可行性，并联合顺铂治疗。