靶向小鼠双微体扩增基因（MDM2）基因显像与治疗中应用研究

细胞凋亡是生物体维持自身动态平衡的基因调控自主过程。异常细胞凋亡，如：促凋亡蛋白钝化、突变或抗凋亡蛋白表达上调能中断细胞增殖和死亡之间的动态平衡,进而诱发多种疾病,比如肿瘤。小鼠双微体扩增基因（MDM2）是细胞凋亡重要调节子，在许多肿瘤过度表达，且在肿瘤发生、发展及生物学行为上起重要作用，MDM2基因已成为肿瘤基因治疗中的重要靶点。目前，针对MDM2基因表达情况的诊断方法主要在体外，如：RT-PCR、Western印迹、免疫组织化学等。本课题将MDM2基因作为靶点，应用99Tcm标记MDM2混合骨架寡核苷酸合成MDM2分子探针，通过一系列体内、体外研究探讨该探针在荷瘤裸鼠模型显像的可行性，并将MDM2反义基因显像应用到肿瘤的放化疗敏感性的评价中。本课题将合成新型分子探针，活体肿瘤模型上准确评估MDM2基因表达量，这对于MDM2基因功能研究及基因治疗等方面具有重要意义。

目的：以MDM2作为靶点，体外合成MDM2分子探针，通过一系列体内、体外研究探讨应用该探针进行荷乳腺癌/前列腺癌裸鼠模型显像的可行性，并将MDM2分子成像应用到临床，探讨MDM2分子成像是否能预测肿瘤化疗敏感性。方法：以HYNIC作为双功能螯合剂，应用99mTc标记MDM2反义寡核苷酸合成分子探针，体外检测分子探针的放射性标记率、放射性化学纯度、在癌细胞中的摄取动力学、与互补序列的结合能力，体内观察分子探针在荷乳腺癌/前列腺癌裸鼠的生物学分布，并进行荷乳腺癌/前列腺癌裸鼠MDM2分子成像研究，MDM2表达程度不同荷乳腺癌/前列腺癌裸鼠分别进行化学药物治疗，MDM2分子成像评估肿瘤区MDM2表达程度并与荷乳腺癌裸鼠化学药物治疗结果比对。结果：MDM2分子探针的放射性标记率是（57.24±2.98）%，放射性化学纯度大于95%，MDM2分子探针能够与目的序列特异性结合，在乳腺癌细胞中能得到较大摄取比率，清除较缓慢，分子探针在荷乳腺癌/前列腺癌裸鼠体内主要通过肝、肾排泄，注射后1-10h，分子探针能在肿瘤区特异性分布，荷乳腺癌/前列腺癌裸鼠MDM2分子成像肿瘤显像清晰，能够准确评估乳腺癌MDM2表达程度，MDM2表达程度不同荷乳腺癌裸鼠对化学药物治疗反应不同。结论：利用MDM2分子探针能够成功进行荷乳腺癌/前列腺癌裸鼠分子成像，该方法能够在活体内无创伤性评价乳腺癌组织MDM2表达程度，预测荷乳腺癌裸鼠对化学药物治疗敏感性。