胰腺腺泡细胞介导REG Ialpha在胰腺导管腺癌发病中的作用及机制研究

肿瘤微环境是决定肿瘤细胞行为的主要影响因素。研究表明，间质信号和细胞-细胞间的相互作用在胰腺癌的发病过程中发挥了重要作用。REG Ialpha是再生基因家族成员之一。最近，本课题组报道REG Ialpha过表达能显著增强胰腺导管癌细胞株的增殖；进一步研究发现胰腺癌微环境中腺泡细胞REG Ialpha的mRNA和蛋白表达水平较导管癌细胞均显著增高，提示腺泡细胞可能介导REG Ialpha参与胰腺癌的发病。本课题将以这些重要的研究结果为基础，通过逆转录病毒系统建立稳定高表达REG Ialpha的腺泡细胞，从细胞和整体水平研究腺泡细胞介导REG Ialpha在胰腺导管腺癌发生、发展和转移中的作用及意义，并探讨REG Ialpha可能的致癌机制。这些原创性工作不仅可以拓展REG Ialpha的功能，加深对胰腺癌肿瘤微环境的认识，而且可望为胰腺癌发病机制的研究及其治疗提供新的思路。

肿瘤微环境是决定肿瘤细胞行为的主要影响因素。研究表明，间质信号和细胞-细胞间的相互作用在胰腺癌的发病过程中发挥了重要作用。REG Iα 是再生基因家族成员之一。在前期研究中，本课题组发现REG Iα过表达能显著增强胰腺导管癌细胞的增殖；进一步研究发现，胰腺癌微环境中腺泡细胞REG Iα的mRNA和蛋白表达水平较导管癌细胞均显著增高，这提示腺泡细胞可能介导REG Iα参与胰腺癌的发病。本课题将在这些重要发现的基础上，从细胞和整体水平研究腺泡细胞介导REG Iα在胰腺导管腺癌发生、发展和转移中的作用，并探讨REG Iα可能的致癌机制。按照研究计划，本课题组首先构建包含整个人REG Iα基因的重组逆转录病毒表达载体，建立了稳定过表达REG Iα的原代腺泡细胞株，在体外初步研究了腺泡细胞REG Iα过表达对导管癌细胞增殖、运动能力的影响。由于从人胰腺组织分离出的原代腺泡细胞量远不能满足实验所需，通过查阅相关文献，在不影响实验理论基础及课题设计的前提下，课题组决定采用大鼠腺泡细胞株AR42J代替人胰腺腺泡细胞开展后续实验。本课题组首先构架了稳定过表达人REG Iα基因的大鼠腺泡细胞株AR42J-REG Iα，将其与人胰腺导管癌细胞SW1990、BxPC3非混合共培养。研究发现，与AR42J-REG Iα共培养后，SW1990和BxPC3的增殖及抵抗缺氧诱发凋亡的能力均明显增强，其运动、侵袭功能没有明显改变。进一步体内研究发现，将与AR42J-REG Iα共培养的胰腺癌细胞SW1990和BxPC3皮下注射裸鼠28天后，肿瘤体积及瘤重较对照组均明显增加；而胰腺癌静脉转移小鼠模型则显示，REG Iα未参与胰腺癌细胞的侵袭转移。最后，通过荧光素酶实验发现转化生长因子-β1（TGF-β1）可能参与了对REG Iα的调控。本课题探讨了腺泡细胞介导REG Iα在胰腺癌发病中的生物学功能，证实了腺泡细胞参与胰腺癌发病的潜在作用，加深了对胰腺癌肿瘤微环境的认识，为胰腺癌的发病机制研究及其治疗提供新的思路。该部分研究内容已完成，目前处于论文投稿阶段。. 本课题基本按照原计划完成，并做了相应的修改。利用本课题经费的资助，课题组共发表SCI 收录论文4篇（累计影响因子16.3 分），国内I 级杂志收录论文4篇。培养博士研究生和硕士研究生各1 名，顺利完成预定计划。