脑缺血中12/15脂氧酶对PPARgamma的调节作用及作用机制研究

脑卒中是神经系统常见病,阐明其分子机制对于治疗具有重要意义。核因子PPARg抑制炎症减轻脑缺血损伤。前期我们首先发现脑缺血中12/15脂氧酶对PPARg可能具有潜在调节作用(Brain Res.),但具体机制不清。因此本研究拟解决的科学问题是脑缺血中12/15脂氧酶对PPARg调节作用和机制。以体内外脑缺血模型为研究对象,检测12/15脂氧酶表达和产物水平;应用其抑制剂、产物和基因过表达等手段干预12/15脂氧酶途径，多方法分析对PPARg表达和活性的影响。利用PPAR反应元件荧光素酶报告载体,检测其产物对PPARg转录活性的影响。在此基础上，进一步观察产物的炎症抑制作用，以 PPARg拮抗剂验证该作用由PPARg介导，从而揭示脑缺血中12/15脂氧酶通过产物激活并上调PPARg，抑制炎症反应; 将为深入研究脑缺血PPARg调控机制和12/15脂氧酶作用提供新认识,为脑缺血治疗提供新线索。

本研究的体内、体外实验结果显示，缺血脑组织12/15-脂氧酶（LOX）表达和活性（产物水平）增加。LOX抑制剂baicalein和反义寡聚核苷酸（antisense oligonucleotides）均可下调PPARγ的表达和活性（PPARγ蛋白表达，核移位，靶基因表达等）；而直接给予LOX产物（13-HODE，12-HETE，15-HETE）则可上调PPARγ的表达和活性，提示LOX途径对PPARγ具有调节作用。利用PPAR反应元件荧光素酶报告载体检测显示，LOX产物可增加PPARγ-DNA结合活性，进一步提示产物对PPARγ具有激活作用，增加其转录活性。另，外源性给予LOX产物可抑制缺血损伤引起的炎性因子表达（iNOS和COX-2），且该作用可被PPARγ抑制剂GW9662所拮抗，提示LOX产物的炎症抑制作用由PPARγ介导。因此，本研究结果证明了脑缺血中LOX通过产物激活并上调PPARγ，进而抑制缺血诱导的炎症反应; 本研究明确了缺血脑组织中LOX通路对PPARγ的调节作用和机制，以及缺血脑组织中LOX调节PPARγ的意义，为脑缺血治疗提供了新认识和线索。