蒙药白益母草干预Noxs介导的VSMC表型调控修复血管损伤的机制研究

Cardiovascular disease has been the primary cause of mobidity and motality for human life. Dysfunction and constructional heterization of vascular is the principle of initiation and progress in the disease. According to theory of Mongolian Medicine, the critical mechanism of the disease is “hot injurys vascular, or filth permeates into blood”, which results in disorders of vasculature. The symptoms are conformity with atherosclerosis and hypertension. Our research indicated that total alkaloids of Mongolian herbal Panzeria alaschanica Kupr. with effects of promoting blood and stasis- resolved, prevented myocardial ischemia induced by isoproterenol on rats, and inhibited intimal hyperplasia on mice. It kept vascular smooth muscle cell contractile phenotype subjected to low serum and PDGF-BB. Based on advanced investigations and Mongolian medicine theory, this project aims at critical factors, focuse on “vasculture”, testifying the effect of alkaloids on inflammatory factors in serum and the regulation net of vascular smooth muscle cell mediated by NADPH Oxidase-ROS. Clarifying the regulation mechanism of the characteristic proteins (α-SMA, SM MHC, SM22α) expression of vascular smooth muscle cell by phenotypes regulatory transcription factors (mycardin, SRF). Verifying critical points in the phenotype regulation signal cascade. Based on above evidences assess the potential target for new drug discovery of cardiovascular diseases. Likewise complement “three principle roots” of Mongolian Medicine with scientific explanation.

血管平滑肌细胞表型的改变是血管结构异常所导致的心脑血管病的病理基础，药物干预血管平滑肌细胞表型调控成为血管病变治疗新的切入点。蒙医学理论认为“热灼脉壁或浊入血分”是脉管失调的关键病机。我们前期研究发现蒙药白益母草总生物碱可抑制血管内膜增厚，维持血管平滑肌细胞收缩表型。基于此，在蒙医学理论指导下，本课题将从血管病变发生、发展的核心病机—脉壁入手，确证白益母草总生物碱对血清炎症水平（CRP、IL-6、TNF-α）和NADPH Oxidase-ROS介导的血管平滑肌细胞表型转变的干预效应，揭示其通过转录因子Myocardin、SRF调控收缩表型特征蛋白 α-SMA、SM MHC、SM 22α表达的机制，探寻白益母草总生物碱干预表型调控的关键节点。以此为依据，判断血管平滑肌细胞表型调控关键节点的药物靶向可行性，为血管病变性疾病治疗提供新的思路。丰富以“三根”为治则的蒙医药理论的科学内涵。

本项目是以明确蒙药白益母草总生物碱干预Noxs-ROS介导的血管平滑肌细胞表型调控的关键节点，阐明蒙药白益母草对血管损伤保护的作用机制为目标，并以白益母草保护血管损伤的确证性研究为依据，推测上述关键节点药物靶向的可行性，为血管病变性疾病治疗提供新的思路；同时为阐述蒙医对心脑血管病的治疗和用药提供实验性证据支撑。.通过研究发现，白益母草总生物碱和总黄酮均具有较好的抑制内膜剥脱小鼠血管增生的作用，内膜层内皮细胞NOX-4的表达与内膜修复密切相关。血管平滑肌层细胞在血管内膜损伤过程存在明显的表型转换。白益母草总生物碱及其生物碱单体成分水苏碱和益母草碱对PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞表型转换具有一定的抑制作用。其可能通过SRF和Myocardin信号通路调控细胞骨架蛋白表达，维持平滑肌细胞收缩表型特征和功能，抑制其向合成型转化。该研究从分子水平和药效两方面验证了蒙医药理论指导疾病治疗上科学性。.本课题对蒙药白益母草的抗炎作用进行了研究。白益母草醇提取物和总生物碱对脂多糖诱导的脓毒症具有显著的保护作用，对中性粒细胞和淋巴细胞具有一定的调控作用，降低了肠组织IL-6的水平。在另两项无菌性炎症模型上也表现出对中性粒细胞的调节作用。该抗炎活性发现为白益母草在炎症性疾病治疗上的应用奠定了可行性的工作基础。.本课题对白益母草基原植物脓疮草及其同属植物进行了分类学的研究。一直以来脓疮草属植物的分类存在歧义。本研究从植物DNA条码和化学成分指纹图谱两方面对其进行聚类分析，结果表明除生长于新疆的小花脓疮草外，其他地区分布的脓疮草均可聚为一类。该结果更倾向于支持赵一之教授对脓疮草进行的分类学定义，即脓疮草复合体。另外，对脓疮草资源的预测分析提示脓疮草面临着资源匮乏，需要给予资源保护和扩大资源再生范围。