Toll样受体4信号通路在角膜新生血管形成机制中的作用研究

角膜新生血管(CNV)是目前常见的致盲原因之一，其发病机制至今未明。我们在碱烧伤CNV动物模型中发现：Toll样受体(TLR)4基因的缺失抑制CNV的形成；受损局部释放的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)可激活TLR4参与CNV形成。本项目拟在这基础上，进一步通过基因敲除，RNA干扰、拮抗剂阻断等方法，应用Microarray、real-time PCR，ELISA，组织病理学分析和过继转移等技术，从分子、细胞和整体水平上探讨TLR4信号通路在调节生物活性介质的表达、各种亚型炎症细胞的局部浸润和血管内皮祖细胞（EPCs）的增殖动员等在新生血管中的作用，本项目的完成将为进一步阐明CNV的发生机理提供新的理论依据，并为该类疾病的防治提供新靶点。

角膜新生血管(CNV)是目前常见的致盲原因之一，其发病机制至今未明。我们在前期中发现，Toll样受体(TLR)4基因的缺失抑制 CNV 的形成；受损局部释放的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)可激活TLR4参与CNV形成。本项目在这基础上，从分子、细胞和整体水平上进一步探讨了TLR4信号通路在调节生物活性介质的表达、各种亚型炎症细胞的局部浸润和血管内皮祖细胞（EPCs）的增殖动员等在新生血管中的作用，研究结果发现，受损角膜局部募集的EPCs 明显增加，活化TLR4受体的外源性激动剂HMGB1和LPS 明显增加EPCs的募集，而TLR4的 拮抗剂HMGB1 A-box 和 LPS-RS能够抑制EPCs的募集。角膜碱烧伤后局部组织趋化因子SDF-1的mRNA和蛋白均明显表达增加，外用SDF受体的拮抗剂 AMD3100抑制烧伤局部内皮祖细胞募集和CNV EPCs的募集与CNV形成。这些结果说明角膜碱烧伤后局部组织通过TLR4调节SDF-1趋化因子的产生从而调节内皮祖细胞局部募集在角膜血管增生在起重要作用。