Toll样受体接头蛋白Tollip在血管内膜新生的作用及其机制研究

Tollip(Toll interacting protein), an adaptor molecule in Toll-like signal transduction pathway with negative regulation factors effect, which plays a crucial role in innate immunity. Previous experiments reveal that compared with sham, Tollip protein level is elevated 14 days after a carotid artery guide wire injury operation, and tollip-/- mice show a significantly more serious neointimal hyperplasia phenotype. This results hint that Tollip may inhibit the process of neointimal hyperplasia. This project will clarify the role and mechanism of Tollip in neointimal hyperplasia at cell, animal and molecular levels. We generate AdTollip and AdshTollip adenoviruses to infect neonatal mice aortic smooth muscle cell in order to investigate the role and mechanism of Tollip in neointimal hyperplasia at cell level. Meanwhile, we generate a Tollip knock-out mice model and Tollip over expression mice model which were subjected to carotid artery guide wire injury method and obverse the time course after the surgery to clarify the role and mechanism of Tollip in neointimal hyperplasia. We try to investigate the role and mechanism of Tollip in neointimal hyperplasia both in vivo and in vitro to provide a new molecular target for prevention and therapy of atherosclerotic vascular remodeling.

Tollip是在天然免疫中起重要作用的Toll样信号转导通路的接头分子，发挥负调节因子效应。前期预实验发现：野生型小鼠导丝损伤颈动脉术后14天相较假手术组Tollip蛋白表达明显减低；而Tollip基因敲除小鼠术后血管内膜新生程度明显增加，提示Tollip蛋白可能对血管内膜新生具有显著的抑制作用。本项目拟通过构建Tollip过表达和RNA干扰腺病毒，分别感染小鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，研究其对血管内膜新生的作用及其机制；通过构建Tollip基因敲除及平滑肌细胞特异性过表达小鼠，并通过导丝损伤颈动脉建立小鼠血管内膜新生模型，观察术后不同时间Tollip对血管内膜新生的影响探讨其相关机制。从基因敲除和过表达，整体和细胞水平多个层面充分阐明Tollip对血管内膜新生的作用以及可能的分子机制，为防治动脉粥样硬化性血管重塑提供新的治疗靶点，为进一步研究新的治疗策略提供理论依据。

Tollip 是在天然免疫中起重要作用的Toll 样信号转导通路的接头分子，发挥负调节因子效应。前期预实验发现：野生型小鼠导丝损伤颈动脉术后 14 天相较假手术组.Tollip 蛋白表达明显减低；而 Tollip 基因敲除小鼠术后血管内膜新生程度明显增加，提示Tollip 蛋白可能对血管内膜新生具有显著的抑制作用。本研究主要探讨Tollip 蛋白在血管内膜新生中的作用和可能机制。拟通过构建Tollip 过表达和RNA 干扰腺病毒，分别感染小鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，研究其对血管内膜新生的作用及其机制。研究发现在PDGF-BB刺激血管平滑肌增生和血管损伤的小鼠模型中Tollip表达一过性增加，在急性期后则逐渐降低，提示Tollip可能参与内膜增生的病理生理过程。通过构建Tollip 基因敲除及平滑肌细胞特异性过表达小鼠，并通过导丝损伤颈动脉建立小鼠血管内膜新生模型，研究提示Tollip-KO能够通过促进血管平滑肌细胞增生、转分化和促进平滑肌迁移，加重血管内皮损伤后增生反应。而Tollip过表达能够通过抑制血管平滑肌细胞增生、转分化和平滑肌细胞迁移，减轻血管内皮损伤后增生反应。Tollip过表达在血管生成中发挥保护性作用的机制与抑制 Akt依赖的信号通路有关。本项目从基因敲除和过表达，整体和细胞水平多个层面充分阐明Tollip 对血管内膜新生的作用以及可能的分子机制，为防治动脉粥样硬化性血管重塑提供新的治疗靶点，为进一步研究新的治疗策略提供理论依据。