Endoglin 适配体/IP-10生物反应器定向募集特异性CTL抗肿瘤研究

在肿瘤特异性CTL过继疗法研究领域，如何靶向募集足够量的CTL到达肿瘤部位以及增强其在肿瘤局部杀伤肿瘤细胞的生物活性是必须攻克的难题。结合前期工作基础，本课题建立黑色素瘤动物模型进行研究，拟采取的策略是通过人工抗原呈递细胞(aAPC)制备足量的黑色素瘤特异性CTL, 同时运用SELEX技术从随机ssDNA文库中筛选出能与肿瘤新生血管标志分子Endoglin特异结合且无免疫原性的适配体后，将其与负载IP-10基因重组子的纳米脂质体交联成一种"Endoglin适配体/IP-10生物反应器"，通过这种生物反应器让肿瘤部位靶向获得高浓度IP-10,利用IP-10对T细胞的定向趋化和促进淋巴细胞活化增殖作用，实现将过继的CTL细胞靶向富集至肿瘤部位，并增强它们对肿瘤细胞靶向杀伤活性的目的。这必将大大提高CTL攻击肿瘤细胞的靶向性和有效性。该研究的成功为肿瘤免疫过继疗法由实验向临床应用迈出一大步。

该项目的研究工作主要建立一种新的人工诱导体系在体外成功诱导出黑色素瘤TRP2特异性 T 淋巴细胞，具有较强的增殖能力和分泌高的IFN-γ的能力，并对小鼠黑色素瘤细胞有特异性杀伤活性。成功构建小鼠IP-10质粒并获得相关抗肿瘤效应靶向蛋白。成功建立了纳米脂质体技术。采用该纳米脂质体技术研制的负载小鼠IP-10质粒的转铁蛋白纳米脂质体在小鼠动物模型上能同时实现肿瘤靶向治疗和靶向成像监测治疗效果。采用该纳米脂质体技术成功研制纳米粒子FA-CS-mIP-10，该粒子在体内体外均能有效靶向肿瘤细胞，在肝癌小鼠体内有明显的抗肿瘤生长作用并延长荷瘤小鼠生存期，并进一步明确了该粒子通过抑制调节性T细胞，刺激体内肿瘤特异性T细胞IFN-γ分泌增多，抑制肿瘤血管生成，抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡等机制来达到抗肿瘤作用。FA-CS-mIP-10协同TRP2特异性 T 细胞治疗小鼠黑色素瘤能有效抑制皮下肿瘤生长，延长黑色素瘤小鼠生存时间，降低机体内和肿瘤局部免疫抑制因子MDSC和Treg，抑制血管生成，抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡。成功建立了SELEX技术，并筛选到了特异性较高的小鼠Endoglin适配体。并成功研制出Endoglin适配体/IP-10生物反应器，该生物反应器能有效特异结合相应靶细胞，在荷瘤小鼠体内有明显的抗肿瘤生长作用，并进一步明确了该生物反应器通过抑制骨髓来源抑制细胞机制来达到抗肿瘤作用，同时该生物反应器协同TRP2特异性 T 细胞治疗小鼠黑色素瘤能产生有效抗肿瘤效应。该研究成果为肿瘤免疫过继疗法提供了新的策略，具有重要的理论意义和广泛应用前景。部分成果已经发表在国际期刊Clinical Cancer Research、Cancer Immunol Immunother、Asian Pacific Journal of Tropical Medicine等杂志上和申请相关专利。培养博士研究生1名，硕士研究生4名，中青年学术带头人1名，多次参加国内国际学术会议交流，并在会上报告学术论文。