转录因子IRF4在固有淋巴细胞ILC介导的炎症性肠病中的调控机制研究

Inflammatory bowel disease (IBD), mainly including Crohn's disease (CD) and ulcerative tcolitis (UC), has high recurrence and a long-term affection of life quality. In recent years, there`s a rapidly increase of IBD cases in China. However, the exact cause remains unknown, which blocks the way to recovery.As the innate mirror image of T help cell, newly indentified ILCs are highly concerned. It is a necessary innate lymphocyte in intestinal immunity, and an important source of pro-inflammatory cytokines in IBD. Reports showed that ILC2, ILC3 ,which are major source of type 2 cytokines and IL-17 distinctly, play a key role in the initiation and maintenance of inflammation in UC and CD respectively.Now, the research of molecular mechanism in ILC transcription factors mainly focus on the influence of development, thus, very little is known about its regulatory function of ILC in gut. Though the Interferon regulator factor 4 (IRF4) is essential in the differentiation and cytokine production of T help cell, the molecular mechanism in intestinal ILC has not been report yet..Our project will generate IRF4 conditional knockout mice with strains such as hCD2cre mice to evaluate its influence of development and function in ILC, to illustrate the function of intestinal ILC through mice model of IBD. Also, with IBD patients intestinal sample data analyzing, we can provide new idea and method for IBD treatment.

炎症性肠病（IBD）包括克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)，长期影响患者生活质量，复发率高。近年来我国IBD病例快速增长，但由于病因未明，目前尚无治愈方法。作为Th的镜像细胞，新近发现的固有淋巴细胞（ILC）受到广泛关注。其在肠道免疫中发挥重要作用，并是IBD中相关炎症因子的重要来源。研究表明，ILC2、3在IBD的炎症起始、维持、炎性细胞招募及下游获得性免疫激活中分别具有重要作用。目前，ILC分子机制研究主要集中于转录因子对其发育的影响，而相关其在肠道中的功能调控却知之甚少。干扰素调节因子IRF4在Th细胞分化及功能有重要作用，但其在肠道ILC中的分子机制还未见报道。本项目将构建IRF4条件性基因敲除小鼠来分析其对ILC发育和功能的影响，并通过建立IBD疾病小鼠模型和研究IBD患者肠道标本数据，从分子机制上阐明肠道固有层淋巴细胞在炎症性肠病中所发挥功能，进而为IBD治疗提供新的思路。

固有淋巴细胞（Innate lymphoid cells，ILCs）是一群新近发现的固有免疫细胞，由于能够同时发挥获得性免疫相关功能而受到广泛关注。这群细胞表面没有重排相关TCR 受体，也不具有髓系细胞和树突状细胞的表型标志和细胞形态特征。由于ILC 产生Th 相关的细胞因子，与Th 细胞在功能上也有很多相似之处，因而被认为是Th 细胞的“镜像细胞”。IRF4 是干扰素调节因子（Interferon Regulator Factor，IRF）家族成员之一，限制性表达于免疫细胞，通过一系列信号转导作用参与免疫调控，也是淋巴样细胞、髓样细胞、树突状细胞分化的关键调节因子。T 细胞中，IRF4 对于CD4+T 细胞分化为Th2，Th9 及Th17 十分重要。此外，IRF4 在肠道炎症性疾病中可能发挥其重要功能也于最近的临床和小鼠模型研究中得到证实。因此，本课题主要通过构建转录因子IRF4在ILC中特异性敲除的小鼠，研究肠道内表达IRF4的ILC细胞在细菌感染导致的肠道性炎症疾病中的功能。本项目构建和证明两株新的工具小鼠品系用于肠道组织特异性ILC亚群基因敲除分析。研究转录因子IRF4和Runx3在肠道组织特异性ILC3和ILC1中的功能和调控机制。建立肠道组织特异性ILC亚群分离分选技术用于单细胞测序研究。