CA916798基因通过PI3K/AKT通路参与顺铂耐药的机制研究

CA916798基因是我们在前期研究和上一项目No.30470773资助下首先发现、报告并证实的与肺癌顺铂耐药相关的新基因，但其对顺铂耐药的机制仍不清楚。前期已证实抑制该基因或PI3K/AKT通路均可逆转肺腺癌MDR细胞A549/CDDP对顺铂耐药，据此推测该基因可能是PI3K/AKT通路作用的底物或靶点。本课题拟以A549和A549/CDDP为研究对象，建立相应细胞系，在持续激活AKT1或分别抑制AKT1、PI3K、CA916798、mTOR表达的情况下，检测加入顺铂后各组细胞PI3K、AKT1、CA916798、mTOR、P70S6K1、凋亡相关基因及蛋白表达、药敏的变化；另外，建立裸鼠移植瘤模型并予顺铂治疗，观测在分别或联合加入PI3K抑制剂、mTOR抑制剂时对肿瘤大小以及上述指标的影响，从正反两方面探讨该基因对顺铂的耐药机制，为进一步明确该基因对顺铂耐药的机理进而逆转耐药奠定基础。

多药耐药是导致肿瘤化疗失败的重要原因。我们以往的研究表明，肺癌耐药相关基因CA916798过表达能够导致肺癌对顺铂耐药，但其机制尚不清楚。本项目研究发现：在化疗耐药的人肺腺癌标本中p-AKT、p-mTOR和CA916798的表达水平均显著增加；免疫荧光和免疫共沉淀的结果表明：CA916798导致肺癌耐药可能与p-AKT1活化有关。对A549和A549/CDDP细胞株的进一步研究表明：持续激活AKT1能够通过mTOR信号通路刺激CA916798表达上调，分别抑制AKT1、PI3K、mTOR均能抑制CA916798的表达；而抑制CA917698基因的表达对PI3K、AKT1、mTOR的表达无影响，提示PI3K/AKT/mTOR通路位于CA916798的上游。通过裸鼠移植瘤实验证实：PI3K抑制剂LY294002能有效抑制CA916798在体内的表达。此外，LY294002联合雷帕霉素抑制CA916798表达明显优于单用LY294002。本研究明确CA916798基因是PI3K/AKT/mTOR通路下游作用的靶点，CA916798基因对肺癌顺铂的耐药是通过PI3K/AKT通路调控实现的。本研究为进一步明确肺癌顺铂耐药的机制进而逆转耐药奠定了基础。