以单核/巨噬细胞内钠通道为靶点调节心肌梗死后组织修复进程

单核/巨噬细胞生物表型转化在心肌梗死后的炎症反应和组织新生中发挥着重要作用：具有促炎症表型的单核/巨噬细胞主要执行吞噬、趋化等作用；而具有分泌表型的单核/巨噬细胞则可通过旁分泌作用促进组织新生和重塑；提示促进单核/巨噬细胞由促炎症表型向分泌表型转化，将有助于加速组织的修复。新近研究提示，巨噬细胞内钠通道参与了单核/巨噬细胞表型的转化，而我们的前期工作亦发现钠通道阻断剂苯妥英钠可通过作用于巨噬细胞加速心肌梗死后组织修复进程。本项目通过药理学（钠通道阻断剂苯妥英钠和钠通道激动剂藜芦定）、药剂学（制备靶向性被单核/巨噬细胞吞噬的药物加载固体脂质纳米颗粒）和分子生物学方法（相关钠通道RNA干扰），探讨以单核/巨噬细胞内钠通道为治疗靶点的干预措施对其生物学表型和心肌梗死后组织修复的影响；预期结果有助于深入阐释单核/巨噬细胞在心肌梗死后组织修复过程中的病理生理学作用，并具有潜在的临床应用价值。

单核/巨噬细胞生物表型转化在心肌梗死后的炎症反应和组织重塑中发挥着重要作用。本研究旨在探讨以单核/巨噬细胞电压门控型钠离子通道（voltage gated sodium channels, VGSCs）为靶点的干预措施对其生物学表型和心肌梗死后组织修复的影响。我们首先采用大鼠腹腔巨噬细胞和小鼠RAW264.4巨噬细胞系，系统观察了VGSCs的10种α亚基和4种β亚基的表达情况，结果显示两种细胞均有多种功能性组合的VGSCs表达。随后我们采用药理学阻断剂（苯妥英钠和河豚毒素）和激动剂（藜芦定）以及RNAi技术，观察了以VGSCs为靶点的干预对脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）和白介素-4（interleukin 4, IL-4）诱导的巨噬细胞表型偏移的影响；结果显示抑制VGSCs或下调VGSCs表达能够部分逆转LPS诱导的巨噬细胞M1偏移，促进M2偏移。随后我们采用脂质体技术制备了具有单核巨噬细胞吞噬系统靶向性的苯妥英钠脂质体（phenytoin encapsulated liposome, PHT-Lip）。采用大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，观察了PHT-Lip对循环单核细胞亚群以及心肌梗死区组织修复的干预作用。结果显示PHT-Lip能够明显下调循环CD172a+CD43+促炎症单核细胞的数量，降低缺血区炎症反应和纤维化，并改善心功能。在心肌梗死后心室重塑研究领域，我们还深入探讨了粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对心肌梗死后组织修复和电生理重塑的影响，发现虽然G-CSF能够改善梗死后心肌电生理特性，但并不能改善心肌缺血/再灌注损伤后修复和远期左室重塑，尤其是在梗死后即刻进行G-CSF治疗；我们采用近交系Lewis大鼠，利用腹腔异位心脏移植首次建立了 “左心室去负荷心肌梗死”模型，发现在左心室去除压力和容积负荷的状态下，心肌梗死后的组织修复是一种以胶原纤维合成量下降、成熟度降低、空间排列紊乱、炎症消退延迟的异常修复过程。上述工作拓宽了目前对心肌梗死后炎症反应和心室重塑的认识，并进一步丰富了以炎症反应为靶点的梗死后重塑干预策略，具有潜在的临床应用价值。