水稻亚种间杂种雌配子不育基因克隆与功能分析

以染色体片段置换系为材料，在S31精细定位的基础上，利用已经鉴定的在S31区域带有杂合基因型单株自交，产生次级分离群体，利用紧密连锁的标记鉴定重组单株，将基因进一步精细定位。对各个候选基因进行测序，比较亲本在这些候选基因上的序列差异，根据序列差异和进一步精细定位的结果最终确定候选基因。在转基因互补实验中，将置换系的S31-i等位基因导入粳稻中或将Asominori的S31-j基因导入置换系中进行相互转化，获得转基因杂合植株，分析杂合植株小穗育性来验证目的基因。同时，对目的基因进行体外表达，Northern杂交，亚细胞定位和原位杂交等研究手段验证基因的功能。最后，对构建的不育和可育株的近等基因系进行原位杂交和双向电泳，分别从细胞水平和蛋白质水平研究基因的差异。综合上述研究结果，探索其控制杂种半不育的分子机理，为籼粳亚种间杂种优势利用提供理论依据。