基于酵母RNA三杂交的高通量端粒酶特异抑制剂筛选模型的建立及其应用
基本信息
结项摘要
端粒酶的激活是肿瘤细胞区别于正常细胞的重要标志，抑制端粒酶的激活能有效地抑制肿瘤的发生发展。自然产物中存在端粒酶抑制剂的可能性比人工合成的化合物更大，但目前可用于筛选的TRAP法特异性不强，而且不适合微生物代谢产物的筛选。本课题将不同片断的人端粒酶逆转录酶(hTERT)与Gal4-AD重组构成融合表达载体，将克隆了MS2发夹结构的全长人端粒酶RNA(hTR)插入pIIIEx426质粒，共转染L40coat酵母菌，利用该菌基因组中LexA-MS2和报告基因建立RNA酵母三杂交系统，筛选hTERT-hTR结合最佳克隆作为端粒酶高通量抑制剂筛选模型，对2000多株放线菌代谢产物进行筛选和有效成分的分离和活性鉴定，不仅为阐明hTERT与hTR的结合方式提供了更精确的方法，而且为筛选端粒酶抑制剂提供了特异、高效、可用于微生物代谢产物的高通量筛选模型，并有望从中筛选到新的、特异的端粒酶抑制剂。
项目摘要
项目成果
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数据更新时间：2023-05-31
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