RND家族外排系统及其抑制剂对幽门螺杆菌多重耐药的作用

Helicobacter pylori (H. pylori) is an important human pathogen causing GI-related diseases including gastric cancer. The prevalence rate of H. pylori infection in our population is high and range between 60-70%. Antibiotic resistance to metronidazole , clarithromycin and fluoroquinolone plays an important role in treatment failure. Our primary study showed that RND reflux pumps were closely associated with H.pylori resistance and related to high level antibiotic resistance. HP0605 (HefA) is the most important one of the outer membrane of RND efflux pump families may play a role in it. We plan to 1) collect antibiotic resistant H. pylori and its parental susceptible strain, 2)establish in vitro resistant standard strains selected by serial passage antibiotics, 3) construct hp0605 knockout strain and examine the present and expression of hp0605,4) construct hp0605 plasmid and examine the present and expression of hp 0605 of transfected Hp 5)see the effect of proton pump inhibitor on RND families 6) see the effect of berberine and palmatine on RND families. It will help us elucidate the mechanism of RND families in antibiotic resistance. This will bring us target for new drugs invention and antibiotic combination to overcome resistance.

幽门螺杆菌（Hp）是一种能够引起慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌瘤等严重病变的细菌，我国人群的感染率高达60％，Hp对多种抗生素耐药是抗生素联合根除治疗失败的主要原因。我们的前期试验发现，幽门螺杆菌RND外排系统在多重耐药菌株中高度表达，并和高度耐药相关。而其中hp0605编码的外排蛋白可能在其中起主要作用。我们拟对分离自患者的抗生素敏感/耐药菌株和抗生素敏感标准株/体外抗生素选择标准菌株后得到的多重耐药菌株进行hp0605基因表达的检测，并观察其与抗生素基因突变的关系。构建基因敲除菌株，观察菌株是否成为敏感株。并同时构建hp0605质粒，转染敏感菌及敲除菌株，检测幽门螺杆菌对不同抗生素的最小抑菌浓度（MIC），观察hp0605高表达对耐药的影响。同时进行了RND外排系统的抑制剂质子泵抑制剂、小檗碱和巴马亭在RND外排系统参与幽门螺杆菌耐药中的作用。这对于临床根除多重耐药幽门螺杆菌有积极的意义。

幽门螺杆菌（Hp）是一种能够引起慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌瘤等严重病变的细菌，我国人群的感染率高达60％，幽门螺杆菌对多种抗生素耐药是抗生素联合根除治疗失败的主要原因。幽门螺杆菌外排系统在多重耐药菌株中高度表达，并和高度耐药相关。并不是所有的幽门螺杆菌 MDR 株均存在外排泵相关蛋白编码基因高表达，且后者的表达量与抗生素对幽门螺杆菌MDR 株的MIC 无显著相关性，提示幽门螺杆菌MDR 的多重耐药不是完全由外排泵所致。进而进一步研究甲硝唑的耐药机制,幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药有着特殊性,增大甲硝唑的剂量可以克服耐药,或合并铋剂的使用也可以克服耐药。因此研究甲硝唑耐药有这重要的临床意义。并进一步用幽门螺杆菌感染小鼠，模拟慢性炎症、癌前病变和肿瘤的发生发展，为后续的动物实验奠定基础。另外，中国幽门螺杆菌（H. pylori）感染率高，导致公共卫生负担严重。医学专家尚未就此问题就人口干预的最佳解决方案达成一致。因此进行了一项基于人群的幽门螺杆菌筛查和治疗策略的健康经济评估，用于预防胃癌，消化性溃疡病（PUD）和非溃疡性消化不良（NUD）。得出与无屏幕策略相比，基于人群的幽门螺杆菌感染筛查和治疗策略在中国无症状一般人群中预防胃癌，PUD和NUD更便宜，更有效。对于幽门螺杆菌和结直肠腺瘤的关系也进行了研究，分析表明幽门螺杆菌感染可能是CRA的危险因素。