基于在线色谱－胆碱酯酶－质谱联用技术的活性检测方法的建立及其筛选贝母类中药中胆碱酯酶抑制剂的应用

拟建立一种基于在线的液相色谱－胆碱酯酶－质谱联用技术的生物活性检测新方法，并应用此方法筛选贝母类中药中抗老年性痴呆症的药效物质基础。该联用技术集液相色谱强大分离能力、酶反应高度选择性、质谱检测器高灵敏性及通用性的优势于一体，以"色谱柱后流出液若中存在酶抑制剂，则酶与底物的反应受抑制，相应的反应产物以负峰形式检出"为基本原理，将中药(贝母)提取物经色谱柱分离后，流出液依次与胆碱酯酶（乙酰或丁酰胆碱酯酶）流路及底物（乙酰或丁酰胆碱）流路混合于反应线圈中，用质谱检测器同时采集提取物总离子流图、底物（乙酰或丁酰胆碱）及反应产物（胆碱）的选择离子检测图，通过比较、分析确定真正的具有酶抑制活性的色谱峰，并获得该活性色谱峰的结构信息（分子量或可能的结构）以及作用特点（选择性），从而建立一种从复杂体系中快速筛选、鉴定、评价胆碱酯酶抑制剂的新方法，同时也可为中药药效物质基础及活性评价研究提供新思路与方法。