基于靶酶-凝胶色谱-液相色谱-质谱在线联用的靶向活性筛选新体系的建立

中药活性成分的方法学研究，一直是中药现代化的关键科学问题之一。本项目针对当前中药活性成分筛选研究模式之不足，拟建立一种基于靶酶-凝胶色谱-高效液相色谱-质谱在线联用的靶向活性筛选新方法，并应用于中药复杂体系这一天然组合化学库以快速筛选、鉴定酶抑制剂。即选择胆碱酯酶、血管紧张素转化酶为靶标酶，以贝母类中药为研究对象，将中药提取物与靶标酶孵育后，经凝胶色谱分离得到酶-活性成分复合物，复合物经在线解离、富集后导入液相色谱-质谱系统进行分离与结构鉴定。该筛选体系集酶反应高度靶向性、液相色谱强大分离能力、质谱检测器高灵敏性的优势于一体，具有快速、高效、灵敏、适用于复杂体系的特点，它的建立与成功应用，不仅有望从常用中药贝母中筛选出具有胆碱酯酶或血管紧张素转化酶抑制活性的先导化合物，更重要的是将为从中药中筛选活性成分提供新的研究思路与方法。