基于“成分间相互作用致毒性成分靶器官蓄积”假说的何首乌肝毒性成分研究

自"英国何首乌"事件后，何首乌这一常用中药的安全性受到国内外广泛关注。目前，其与肝毒性相关的物质基础及作用机制尚未得到阐明。在深入分析相关研究报道的基础上，本项目提出了"成分间相互作用致毒性成分靶器官（肝脏）蓄积性中毒"的工作假设。为证实上述假说，本项目拟：1）研究大鼠长期口服给药条件下，何首乌中两类主要成分蒽醌类及其代谢物（最可能毒性成分组）、二苯乙烯苷类及其代谢物（可能毒性成分组）在靶器官（肝脏）的时-量-毒关系，并通过相关性分析，阐明真正的毒效物质基础；2）研究何首乌中两类主要成分蒽醌类化合物、二苯乙烯苷类化合物在体内代谢环节的相互作用，探究它们在毒性发生发展过程中的内在联系与相互作用规律。期望通过本项目研究，阐明何首乌的毒效物质基础及致毒机制，为何首乌质量标准制订、临床安全使用提供科学依据，同时也为筛选有毒中药的毒效物质基础及作用机制提供新的思路与研究方法。

自“英国何首乌”事件后，何首乌这一常用中药的安全性受到国内外广泛关注。在深入分析相关研究报道的基础上，本项目提出了“成分间相互作用致毒性成分靶器官（肝脏）蓄积性中毒”的工作假设。为证实该假说，本项目开展了：（1）采用体内毒代-毒效动力学相结合的方式，阐明何首乌的致肝损伤物质基础及损伤方式。大鼠连续灌胃给药（何首乌提取物）21天后，采用LC-MS方法对何首乌所含主要化合物包括二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖和大黄素在大鼠体内的动态变化进行了表征，并对病理组织切片及血液生化指标进行分析。结果发现，何首乌的长期大剂量灌胃给药可引起肝损伤的发生，并且此损伤作用的产生可能与长期给药时大黄素在大鼠体内的代谢性蓄积有关，适当控制服用剂量则可避免肝损伤的发生。（2）研究二苯乙烯苷类成分对大黄素在大鼠体内药代动力学的影响。采用大孔树脂吸附法实现同步分离富集何首乌二苯乙烯苷类及蒽醌类两大主要成分，利用LC-MS分析技术，考察大鼠灌胃二苯乙烯苷部位一周后，大黄素在大鼠体内代谢情况的改变。结果发现在二苯乙烯苷的作用下，大黄素原型的AUC、Cmax、T1/2z明显增加，相反其葡萄糖醛酸化代谢产物的AUC、Cmax显著降低，即大黄素的II相代谢途径被抑制，导致其原型在体内的暴露量增加。（3）二苯乙烯苷对大鼠肝、肠II相代谢酶类的调控。分析大鼠在灌胃给药二苯乙烯苷部位一周后，肝、肠中II相代谢酶UGT表达的变化，从而揭示二苯乙烯苷部位对大黄素代谢性抑制的作用机制。结果表明，灌胃二苯乙烯苷一周后，大鼠对大黄素的代谢能力产生明显改变，尤其是大黄素在体内的葡萄糖醛酸苷化被明显抑制，其原型暴露量增加，这可能与二苯乙烯苷部位抑制大鼠肝、肠中II相代谢酶UGT1A8的表达有关。通过本项目研究，初步阐明致何首乌肝损伤物质基础及机制，为何首乌临床安全使用提供了科学依据，同时也为筛选有毒中药的毒效物质基础及作用机制提供新的研究思路。