DsbA-L 对线粒体功能和能量代谢的调节作用和作用机制的研究

DsbA-L是由本课题组成员首次发现的与脂联素多聚化和分泌有着重要关系的分子。我们新的研究发现该分子分布在线粒体中，与线粒体呼吸链复合物I成分相互作用，RNAi介导的表达抑制导致复合物I活性明显减少。我们还发现脂肪组织特异性DsbA-L高表达的转基因小鼠表现出升高的脂联素水平和对抗高脂饮食诱导的肥胖和增强的胰岛素敏感性等特征，因此我们推测DsbA-L可能具有保护线粒体功能，改善肥胖的作用。我们拟通过DsbA-L转基因和基因敲除小鼠模型的体内实验，结合培养细胞的体外实验进一步研究DsbA-L对线粒体功能和代谢的调节作用及其中的作用机制， 同时利用脂肪组织DsbA-L高表达而脂联素敲除等动物模型分析DsbA-L的这些作用是否依赖脂联素。本项目的研究将不仅阐明DsbA-L在线粒体功能和代谢调节中的作用和作用机制，而且将为肥胖和胰岛素抵抗等代谢性疾病的发生发展提供新的理论依据。

本项目旨在研究对脂联素的分泌和多聚化起重要作用的蛋白DsbA-L 在减轻高脂饮食诱导的肥胖和增加能量代谢的作用及其作用机制。我们利用高脂喂养脂肪组织DsbA-L过表达转基因和对照小鼠，通过动物能量代谢监测系统观察了小鼠的整体代谢水平和活动的变化，用Seahorse线粒体能量分析仪分析了糖脂代谢相关重要组织（肝脏和脂肪）线粒体的呼吸活动和脂肪酸氧化能力， 用western blot分析mTOR信号通路糖脂代谢相关蛋白的表达。研究发现DsbA-L脂肪组织过表达转基因小鼠的活动显著增加，而且也出现显著增加的肝脏组织线粒体脂肪酸beta氧化功能和线粒体呼吸链的活动。由于课题组成员先前的研究发现DsbA-L过表达不仅增加了总脂联素的水平，而且增加了有活性的高分子量脂联素水平，我们的实验结果进一步说明了这种增加的高分子量脂联素水平可能通过增强了肝脏线粒体的功能和脂肪酸氧化能力，而对高脂喂养引起的脂肪肝起到了保护作用。本项目的研究结果首次发现了高分子量脂联素对肝脏线粒体功能和能量代谢的作用和机制，对进一步了解高分子量脂联素的作用提供了重要数据，具有重要的学术价值。在项目研究期间，课题负责人获得了国家科技部973课题的资助，发表了专著论文1篇，参加了与项目研究内容直接相关的国际学术会议1次，培养了多名中青年学术骨干和博士及硕士研究生。