免疫蛋白质组学筛查、鉴定具有早期诊断价值的人胰腺癌相关膜抗原

基于胰腺癌患者外周血中存在具有早期诊断价值的特异性抗体的新发现，我们提出采用"亚细胞-免疫-蛋白质组学"的新策略以筛查、鉴定具有免疫原性的人胰腺癌相关的膜抗原，通过检测高危人群外周血中的特异性抗体，以实现胰腺癌的早期诊断。在课题中，拟采用膜生物学技术抽提胰腺癌细胞膜蛋白，2-DE将其分离并转移至PVDF膜上；分别用健康人、胰腺炎、胰腺癌及其它消化道肿瘤患者血清IgG与膜蛋白行免疫印迹杂交，质谱鉴定胰腺癌特异的杂交阳性蛋白质斑点（即具有免疫原性的胰腺癌相关的膜抗原）；制备抗膜抗原多抗，行人胰腺癌组织的免疫组化染色，进一步筛查染色阳性的膜抗原，以确定这些从胰腺癌细胞株中筛查出来的膜抗原在体内的确存在；继而采用基因工程技术大量制备膜抗原，并用ELISA法检测胰腺癌高危人群外周血中的特异性抗体，结合其它临床检查结果并随访，最终确定具有早期诊断价值的胰腺癌相关的膜抗原。