CD8+免疫调节/抑制性T细胞在ITP发病中的作用

Primary immune thrombocytopenia (ITP) is an acquired disorder characterized by autoantibody-mediated platelet destruction and insufficient platelet production. Multiple factors have been implicated in ITP pathogenesis, including breakdown of immune tolerance. CD8+ regulatory T cells and suppressor cells, which have been identified in recent years, play important roles in inhibitory function on inflammation. And for the important roles in maintenance of peripheral immune tolerance, CD8+ regulatory/suppressor T cells are involved in immune escape of tumor and pathogenesis of several autoimmune diseases. Until now, the role of CD8+ regulatory/suppressor T cells in ITP etiology was not clear yet. Our previous studies found that the number of CD8+CD25+ regulatory T cells and CD8+CD28- suppressor T cells in active ITP patients were lower than those of normal controls, which indicated that CD8+ regulatory/suppressor T cells were implicated in ITP. Considering the important negative regulatory effect of CD8+ regulatory/suppressor on immune responses, clarification of the role of these cells in ITP will help us better understand the pathogenesis of ITP. In this study, we want to evaluate the number and function of CD8+ regulatory/suppressor in peripheral blood and spleen, and then find the reasons responded to the dysfunction of these cells and CD4+ regulatory T cells. In addition, we will induce the platelets glycoprotein specific CD8+ regulatory T cells, which will provide a theoretical basis of new treatment strategy for the ITP patient.

原发免疫性血小板减少症（ITP）是一种由于自身免疫异常所致的以血小板破坏过多及生成不足为特点的出血性疾病，免疫失耐受在其发生中扮演了重要角色。CD8+调节/抑制性T细胞（Treg/Ts）是最近发现的具有免疫抑制功能的细胞，它们在维持外周耐受中具有重要作用，参与肿瘤逃逸及多种自身免疫病的发生。目前对于CD8+ Treg/Ts在ITP中的作用暂未见报道。我们前期研究发现CD8+ Treg/Ts细胞在活动期ITP病人外周血中的比例明显下降，提示这些细胞参与了ITP的发生。在此基础上，本研究中我们拟扩大样本，评价ITP患者外周血及脾细胞内CD8+ Treg/Ts细胞的数量及功能，探讨导致数量及功能异常的原因，揭示它们在ITP发病中的作用。同时，通过体外诱导血小板糖蛋白（GP）特异性的CD8+ Treg，进而诱导GP特异性免疫耐受，为针对调节性T细胞的靶向治疗提供理论依据。

原发免疫性血小板减少症(ITP)是一种由于分泌自身抗血小板抗体造成血小板破坏过多及生成不足的自身免疫性疾病。研究发现免疫失耐受例如CD4+ 调节性T细胞（Treg）异常、单核细胞上抑制性Fc受体表达下降等参与ITP的发生，但目前为止CD8+ 免疫抑制类T细胞在ITP发病中的作用尚不清楚。本项目探讨CD8+免疫抑制类T细胞在ITP发病中的作用。我们研究发现（1）未治疗活动期ITP患者CD8+CD28-免疫抑制性T细胞（Ts）及CD8+CD25+ Treg 数量较正常对照相比明显下降。进一步免疫抑制功能分析显示ITP患者Ts细胞免疫抑制效率与正常对照相比明显较低，说明ITP患者存在Ts细胞数量及功能的异常。（2）Transwell分析显示ITP患者Ts细胞通过胞间接触的免疫调节能力低下，而分泌抗炎因子的能力正常。（3）进一步机制研究发现ITP患者Ts细胞上共刺激分子ICOS表达较正常对照明显下降。且ITP患者Ts细胞与正常对照抗原提呈细胞（APCs）混合培养后，抑制APCs增殖的能力较正常对照减弱，同时下调CD14+单核细胞上CD80和上调ILT3及ILT4的能力消失。提示ITP患者Ts细胞不能有效的通过胞间接触的方式诱导APCs分化为抑制型APCs，进而对自身反应性淋巴细胞活化的抑制效率降低。（4）采用正常人骨髓来源间充质干细胞（BM-MSCs）与患者CD8+ T细胞混合培养后能明显上调Ts细胞的比例及免疫抑制功能。综上所述，本研究发现ITP患者Ts细胞存在数量减少及抑制功能下降等异常，提示其参与了ITP的发病机制。进一步机制研究显示，ITP患者Ts细胞表面ICOS的表达下调及对APCs增殖及共刺激分子的调节功能异常造成对自身反应性T细胞活化抑制能力的减弱。采用BM-MSCs能有效促进Ts分化并改善其功能。本研究阐明了CD8+ Ts细胞在ITP发病中的作用，有助于我们进一步拓宽对ITP发病机制的认识，同时也为将来Ts细胞为靶点的靶向治疗提供理论依据。该项目共发表文章16篇，其中SCI文章13篇。培养博士毕业生3名，达到预期目标。