广州管圆线虫特异T细胞表位肽对CD8+调节性细胞免疫调节机理研究

The strong helminth-induced immune responses of the central nervous system in host, are the bases of immune pathology in Angiostrongyliasis cantonesis. Regulatory T cells(Treg) can keep the peripheral tolerance and control excessive immune response. Our previous work have found some peptides using proteomics and mass spectrometry, which can be observed to realize the immune regulatory mechanism and utilize their immune regulatory efficiency. Here we analyze the proteomics peptides information, predict the antigen epitopes and verify them by western blot. Then to observe the proliferation and activation of T cells with FCM, detect of antigen presented by dendritic cells in vitro, and thus infer the type of T cell responses. In vivo, we observe lymphocyte change using different animal models with FCM. After immuning with peptide, mice will be observed the lavae reduction and immune pathological injury of brain with attack experimental, and the candidated peptides will be acquired. Finally, according to the previous patients' clinical immunology information and the proliferation of peripheral blood mononuclear cell（PBMC）, the role of the candidate peptides and CD8+Treg in the Angiostrongylus cantonesis will be evaluated.

广州管圆线虫感染产生的抗原组分与宿主间的免疫应答过于强烈，是免疫病理反应的基础。调节性T细胞的诱导可保持外周耐受，控制过度的免疫应答。我们通过探究前期工作中利用蛋白组学和质谱鉴定发现获得的肽段信息的体外体内免疫调节机制，旨在开发和利用CD8+调节性T细胞免疫调节效能。本研究首先分析和预测广州管圆线虫抗原表位并进行免疫印迹验证；继而在体外，用流式细胞技术检测T细胞的增殖与活化、观察树突状细胞的抗原递呈现象，推断T细胞的反应的类型；体内实验中，用不同表位肽免疫不同动物模型，观察淋巴细胞变化、肽段免疫小鼠后用感染攻击实验观察减虫情况和脑组织中的免疫病理损伤，通过上述技术筛选及验证具CD8+Treg功能的肽段；最后，将筛选获得的肽与既往感染患者血清用ELISA的方法进行免疫验证，并通过观察表位肽对既往患者外周血单个核细胞激活增殖反应的影响来评估和探讨候选肽在人群广州管圆线虫病免疫调节中的意义。

广州管圆线虫感染产生的抗原组分与宿主间的免疫应答过于强烈，是免疫病理反应的基础，探究虫体与宿主在相互作用中的调适性改变有望解释疾病发生发展机制。本研究首先通过体外及不同动物模型体内实验筛选T细胞表位肽，获得两组可能不同调控机制的特异T细胞表位肽。继而，将抗原表位肽的相应蛋白再次进行体内验证，发现AcL3感染后Ac-Pas-5和Ac-Galectin-1分别具有增强或减弱宿主免疫应答的作用。而后，发现Ac-Galectin-1能够诱导巨噬细胞凋亡的现象，其具体机制可能为直接激活Annexin A2，继而活化JNK进而引发下游线粒体凋亡信号。最后，从寄生虫的发育改变来探究逃避宿主免疫系统的攻击的可能机制，发现Ac-DAF-16和Ac-DAF-2参与IIS途径调控广州管圆线虫虫体滞育的作用，使得虫体获得逃避宿主免疫系统的攻击的可能。本次研究从广州管圆线虫虫体产生的某些抗原组分、寄生虫本身的发育变化、机体针对虫体发生的免疫调控的变化等方面阐述致病机制，可为神经系统感染性疾病的防治提供调控免疫病理损伤的方法和实验依据。