供体NK细胞与IL-15对非清髓性异基因造血干细胞移植的促进作用及其作用机制

异基因造血干细胞移植较自体或同基因移植疾病复发的危险性明显减少。但是，有一大部分的恶性血液病和肿瘤患者，由于年龄和身体状况的原因，无法承受异基因移植前高强度的免疫抑制，所以进行非清髓性异基因造血干细胞移植具有极大的必要性和非常广泛的应用前景。有研究提出，供体NK细胞在异基因移植中对植入有促进作用，并对受体CD8+T细胞的排异反应具有否决作用，但是供体NK细胞在非清髓性异基因移植中的作用及其否决作用的确切机制还需进一步研究。另有研究表明，IL-15对于NK细胞的发育、存活和功能都起着重要的作用，因此它与供体NK细胞可能协同促进移植植入。本课题旨在阐明供体NK细胞在非清髓性异基因移植中对植入的促进作用及其作用机制，并研究供体NK细胞与IL-15的协同促进作用及其可能的机制，从而为临床在非清髓性异基因移植中应用供体NK细胞特异性地抑制免疫排异、促进植入提供理论基础和优化方案。

研究表明供体NK细胞在异基因造血干细胞移植中能够促进植入，能够特异性的抑制或清除受体反应性的细胞，从而促进供体造血干细胞的植入。为了探寻其作用机制，我们将C57BL/6(H-2b)小鼠的脾细胞作为反应细胞（模拟受体细胞），BALB/C(H-2d)小鼠的脾细胞经致死剂量照射后作为刺激细胞（模拟供体细胞），建立混合淋巴细胞培养体系（MLR）。在此MLR系统中，加入致死剂量照射的BALB/C(H-2d)小鼠骨髓培养的体外激活的NK细胞（ALAK），模拟供体NK细胞。体外实验结果证明：激活的H-2d来源的NK细胞能够特异性的抑制H-2b来源的脾细胞的异基因反应性；颗粒酶介导的杀伤活性可能是这种抑制效应的机制之一，而Fas-Fas配体通路及TGFβ信号通路并非该抑制效应的作用机制。在小鼠的非清髓性的异基因造血干细胞移植模型中，我们也进一步证明了供体NK细胞确实能通过抑制受体异基因反应性促进植入。由于IL-15能够显著促进NK细胞的生物学功能，本课题继续探寻了供体NK细胞和IL-15的联合输注在非清髓性异基因造血干细胞移植中对植入和免疫重建的影响。实验结果证明：在非清髓性异基因造血干细胞移植中联合输注供体NK细胞及IL-15能够协同促进植入，促进供体来源的细胞亚群的发育，并抑制受体鼠的异基因反应性。本课题阐明了供体NK细胞在非清髓性异基因移植中对植入的促进作用及其作用机制，并研究供体NK细胞与IL-15的协同促进作用及其可能的机制，从而为临床在非清髓性异基因移植中应用供体NK细胞特异性地抑制免疫排异、促进植入提供理论基础和优化方案。我们按照原定计划开展了研究，并取得了预期的研究成果，全面完成了预期的考核指标。迄今为止，本项目标注发表SCI论文6篇，其中Journal of Immunology 两篇。项目负责人在国际学术会议应邀专题报告7次,并在国内学术会议上多次应邀报告。在本项目的研究成果基础上，课题负责人继续申请获得国家自然基金面上项目一项。