固有免疫细胞在眼表鳞状上皮化生的效应机制研究

When corneal and conjunctival epithelia turn into a stratified, non-secretory, keratinized epithelium, a pathologic state known as squamous metaplasia may emerge. A number of hereditary and acquired diseases have been found to manifest squamous metaplasia, which constitutes one major type of ocular surface failure leading to corneal blindness.The pathogenesis for squamous metaplasia is less understood. Recently, we investigated corneal pannus tissues from patients with severe ocular surface diseases manifesting squamous metaplasia and noted that such squamous metaplasia is composed not only of keratinocytes but also of a type of immature Langerhans cells (LCs) and macrophages cells. In this study we postulated that immune cells could exert their negative regulation in the repair process of squamous metaplasia. These findings will benefit fully understanding the mechanisms underlying immune-mediated squamous metaplasia, and lead to a new therapeutic approach for treating squamous metaplasia.

鳞状上皮化生作为眼表上皮疾病的主要眼表面功能异常类型，主要表现为病理性的非角化上皮向角化型化生，发病率和致盲率很高。既往的研究认为鳞状上皮化生是由环境、免疫、感染及遗传等多因素相互作用所致。最近，我们以及其他团队的研究发现，Langerhans细胞和巨噬细胞在鳞状上皮化生发生中可能发挥关键作用。在本研究中，我们将深入观察Langerhans和巨噬细胞与眼表上皮细胞的相互作用在不同原因诱导的鳞状化生形成过程中的动态变化，探讨固有免疫细胞在眼表鳞状上皮化生的发生发展过程中的核心作用。本项目的实施将有助于我们从免疫细胞角度认识眼表鳞状上皮化生形成的免疫机制，为我们寻找眼表鳞状上皮化生治疗新靶点奠定基础。

本研究采用HE染色、免疫组织化学、实时荧光PCR、Western blot等方法研究临床、在体动物、离体和细胞水平的角结膜鳞状上皮化生模型，并发现：.（1）通过检测鳞状化生眼表疾病翼状胬肉术后创面过度增生病理组织，国内外首次通过共聚焦显微镜发现基质中存在广泛的新血管形成，伴随着树突细胞和炎性细胞的浸润。组织中上皮角蛋白标记物和杯状细胞特异性粘蛋白标记物的表达下调，且可能与EMT的发生有关。.（2）目前儿童结膜淋巴细胞的研究几乎处于空白状态，我们率先应用活体共聚焦检测健康儿童及过敏性结膜炎患者的结膜组织，分析结膜淋巴细胞密度、滤泡密度、滤泡面积及滤泡反光性，明确健康儿童及过敏性结膜炎有关结膜淋巴细胞T结构、分布及形态学特征。.（3）应用低氧下体外液气界面培养诱导眼表发生组织鳞状化生伴随炎症介质浓度增高等改变，与临床干眼具有类似性。国内外首次发现APR-246/PRIMA-1MET 可抑制体外空气暴露诱导的结膜鳞状上皮化生改变，有望用于眼表鳞状上皮化生类疾病的临床治疗。.（4）应用BAC诱导眼表组织鳞状化生的模型，发现局部BAC可诱导角膜Langerhans细胞成熟和迁移，巨噬细胞活化，并表达细胞连接蛋白，提示BAC不仅能改变角膜Langerhans变角膜DCs的抗原摄取功能.上述结果证实了我们提出“固有免疫细胞LSc和巨噬细胞参与眼表上皮鳞状化生的发生和维持”的假说，为进一步阐明鳞状上皮化生发病机制提供了新的依据，同时也为如何实现免疫应答的精确调控提供新的方向。