基于JNK/SPAK信号通路介导对温针灸治疗KOA机理的实验研究

Knee Osteoarthritis (KOA) is a common disease of the elderly in theNingxia region, warm acupuncture is commonly used therapies for the treatment ofKOA, its therapeutic mechanism is not clear. We pre-clinical studies confirm theefficacy treatment KOA and found that the temperature acupuncture can reduce thethe KOA serum IL-1, IL-6 levels. Cytokines IL-1, IL-6, TNF-a, iNOS and COX-2,MMP-1 and MMP-13 expression and MAPKs signal pathway, JNK / SAPKsignaling pathway MAPKs susceptible to thermal and needle the major signaling pathway activated by the thorns, so imagine warm acupuncture can down-regulateJNK / SAPK signaling pathway treatment KOA,. This subject intends to warm acupuncture intervention the KOA rabbit model line, using immunohistochemistry,RT-PCR, Western blot method, the articular cartilage, bursa and synovial fluid IL-1,IL-6, TNF-a, iNOS in and COX -2, MMP-1, MMP-13, of JNK / SAPK and mRNAexpression levels were detected. The clear warm the mechanism of acupuncturetreatment KOA is achieved by down-regulating JNK / SAPK signaling pathway.

膝骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)是宁夏地区中老年人的常见病，温针灸是治疗KOA的常用疗法，其治疗机理尚不明确。我们前期临床研究证实其治疗KOA疗效确切，并发现温针灸可降低KOA患者血清IL-1、IL-6的水平。而IL-1、IL-6、TNF-a、iNOS、COX-2、MMP-1、MMP-13等细胞因子表达与MAPKs信号通路相关，JNK/SAPK信号通路是MAPKs中易被热敏及针刺所激活的主要信号通路，因此设想温针灸可下调JNK/SAPK信号通路治疗KOA。本课题拟对KOA兔模型行温针灸干预，用免疫组化、RT-PCR、Western blot等方法对其关节软骨、滑囊及关节液IL-1、IL-6、TNF-a、iNOS、COX-2、MMP-1、MMP-13、JNK/SAPK及mRNA表达水平进行检测。明确温针灸治疗KOA的机理是通过下调JNK/SAPK信号通路实现的。

背景：KOA是中老年人常见病，温针灸治疗KOA疗效显著，治疗机理不明。前期发现温针灸可降低KOA患者血清IL-1、6水平，而IL-1、6、iNOS、COX-2、MMP-1、13表达与JNK信号通路相关，易被热敏及针刺激活。温针灸是针刺热治疗，猜想温针灸激活JNK信号通路引起iNOS、COX-2、MMP-1、13表达抑制达到治疗KOA目的。.内容：制备兔KOA模型行温针灸等干预，治疗结束后取兔KOA软骨及血清，采用免疫组化、RT-PCR、Western blot等方法检测iNOS、COX-2、MMP-1、13、JNK1、2表达，明确温针灸治疗KOA作用机理。.结果：①兔KOA经温针灸治疗后关节软骨面光滑，表面干净，与模型组比较，差异显著（P<0.05）；②与模型组比较，温针灸降低兔KOA血清中MMP-1、13表达，差异显著（P＜0.05）；③与模型组比较，温针灸降低兔KOA关节软骨中MMP-1、13蛋白及mRNA表达，差异显著（P＜0.05）；④与模型组比较，温针灸降低兔KOA关节软骨中iNOS、COX-2蛋白及mRNA表达，差异显著（P＜0.05）；⑤与模型组比较，温针灸降低兔KOA关节软骨中JNK1、2蛋白及mRNA表达，差异显著（P＜0.05）。.结论：温针灸治疗兔KOA促进关节软骨修复，延缓关节软骨退变，可能是激活JNK信号通路，抑制JNK1、2、MMP-1、13、iNOS、COX-2表达达到治疗作用。.展望：KOA是关节软骨、细胞外基质及软骨下骨合成与偶联失衡导致。本课题证实温针灸治疗兔KOA激活JNK信号通路，引起关节软骨及细胞外基质相关因子表达变化，是否影响软骨下骨，是下一步研究重点。信号通路是复杂的过程，是否有其他信号通路参与也是下一步研究重点。.科学意义：本课题通过动物实验证实温针灸治疗KOA疗效显著，从现代医学角度阐明其治疗机理，为临床推广使用温针灸疗法提供依据。