基于uPA系统研究针砂马准灸治疗KOA的机理及针砂血清对uPA的调节效应

Knee Osteoarthritis (KOA) is the common disease of the old people in the ningxia region, the zhenshamazhun moxibustion is one of the hui people widely accepted method of treatment of KOA, treatment mechanism is not clear. The uPA system can activate MMP 1, 13, MMP 1, 13 change can reflect the changes of cartilage matrix, those are most closely associated with development of KOA.Preliminary studies confirm that zhenshamazhun moxibustion sand lower MMP- 1、13 in the rabbit model of KOA.So imagine zhenshamazhun moxibustion treatment of KOA is through regulating the uPA in articular cartilage matrix system, cut the uPA uPAR and its receptors, raised PAI signaling pathways, change the uPA system and coordinating role between MMPs and other factors, the purpose of this study is to test this hypothesis.This project will complete the following stydy : (1) zhensha moxibustion can delay the KOA cartilage degeneration; (2)Using molecular biology techniques find : the zhensha moxibustion can cut the uPA, uPAR, raised PAI, inhibit the expression of MMP 1 and 13 in treatment KOA ;(3) Using zhensha moxibustion serum intervene rabbit chondrocytes has proved that there are some active ingredient in zhensha serum. Through the above study, to clarify the mechanism of zhenshamazhun moxibustion treatment of KOA, contain that the zhensha moxibustion can cut the uPA, uPAR, raised PAI, inhibit the expression of MMP 1 and 13 in treatment of KOA and the active substances in zhensha serum can inhibit the expression of uPA and achieve the goal to treat KOA.

膝骨性关节炎(Knee Osteoarthritis，KOA)是宁夏地区中老年人常见病，针砂马准灸（针砂灸）是回族群众广为接受的治疗KOA的方法，治疗机理不明确。uPA系统能激活MMP-1、13，MMP-1、13变化最能反映软骨基质的变化，两者与KOA发展关系密切。前期研究证实，针砂灸能降低兔KOA模型中MMP-1、13表达。因此设想针砂灸治疗KOA通过调控关节软骨基质中uPA系统，下调uPA及受体uPAR，上调PAI信号通路，改变uPA系统与MMPs的协调作用，本研究的目的为验证此假说。本课题拟完成：①针砂灸能延缓KOA软骨退变；②应用分子生物学技术明确针砂灸可激活uPA系统，抑制MMP-1、13的表达；③采用针砂血清干预模型兔软骨细胞，证明针砂血清中含有能抑制软骨退变的活性成分。通过以上研究，阐明针砂灸治疗KOA的机理，及针砂血清中含活性物质能够抑制uPA的表达而达到治疗KOA的目的。

膝骨性关节炎(Knee Osteoarthritis，KOA)是宁夏地区中老年人常见病，针砂马准灸是回族群众广为接受的治疗KOA的方法，治疗KOA机理尚不明确。研究显示uPA系统能激活MMP-1、13，MMP-1、13变化最能反映软骨基质的变化，两者与KOA发展关系密切。前期研究证实，针砂马准灸能降低兔KOA模型中MMP-1、13表达。因此设想针砂马准灸治疗KOA通过调控关节软骨基质中uPA系统，下调uPA、uPAR的表达，上调PAI信号通路，改变uPA系统与MMPs的协调作用，本研究目的为验证此假说。实验通过制备兔KOA模型，行针砂马准灸等干预，观察干预后兔KOA软骨病理改变；检测软骨中uPA、uPAR、PAI-I 、MMP-1、13 mRNA及蛋白的表达；制备针砂血清，培养兔软骨细胞，观察软骨细胞生长及凋亡情况，检测uPA、uPAR、PAI-I、MMP-1、13的表达。结果显示：①兔KOA模型经针砂马准灸治疗后关节软骨面光滑，表面干净，软骨表层基本平整、光滑，软骨细胞分布较均匀，排列整齐，可见软骨细胞成3层排列，无明显的细胞簇集，潮线基本完整，与模型组比较，针砂马准灸组C.Colombo评分降低，差异显著（P＜0.05）；②与模型组比较，针砂马准灸可降低兔KOA软骨中uPA、uPAR、MMP-1、13 mRNA及蛋白表达，差异显著（P＜0.05），升高PAI-I mRNA及蛋白表达，差异显著（P＜0.05）；③与正常血清组比较，模型血清组细胞增殖率降低，差异显著（P <0.05），与模型血清组比较，针砂血清组细胞增殖率增高，差异显著（P <0.05）；与正常血清组比较，模型血清组细胞uPA 、MMP-1、MMP-13 mRNA及蛋白表达增高, 差异显著（P <0.05），与模型血清组比较，针砂血清组细胞uPA 、MMP-1、MMP-13mRNA及蛋白表达降低, 差异显著（P <0.05）,相关性分析结果显示uPA 的升高与降低与MMP-1、MMP-13成正相关（r=0.843，r=0.740，P<0.05）。本课题证实针砂马准灸治疗KOA是通过激活uPA系统，即下调uPA及其受体uPAR的表达，上调PAI-1的表达，进而降低MMP-1、13的表达，改变uPA系统与MMPs协调作用。课题从细胞及细胞外基质证实其治疗KOA的作用机理，为临床推广提供科学依据。