鱼藤素调控急性髓系白血病核磷蛋白及p14arf穿梭作用及亚细胞定位的机制研究

核磷蛋白(NPM)是一种多功能蛋白质，定位于核仁颗粒区，但能穿梭于胞浆-胞核之间，并对其伴侣蛋白p14arf核内的集聚及稳定性起到重要作用。鱼藤素是新发现的一种高效低毒的抗肿瘤中药，具有调控白血病细胞核孔蛋白及核磷蛋白表达和功能的作用。本课题拟从NPM入手，研究AML尤其是NPMc+AML中，NPM基因突变以及由此形成的NPM胞浆异位对p14arf的表达及其亚细胞定位的影响，其对于MDM2/p53、p53下游核心因子NOXA和PUMA以及癌基因c-Myc及其下游基因eIF4E、nucleolin的作用，探讨NPM与p14arf及与其下游基因间的相互关系，进一步研究鱼藤素能否通过直接调控或核孔蛋白的间接作用影响NPM的核浆穿梭行为，降低NPM表达，继而影响p14arf和相关信号通路，从而为鱼藤素在白血病的临床治疗上提供新的理论基础，也为急性白血病的治疗开拓一片全新领域。

NPMc+ AML是近年来髓系肿瘤中新确定的一种独特亚型，是正常核型AML最常见的基因突变。尽管AML的治疗已取得巨大进步，但多重耐药，毒副作用，各种严重并发症，移植相关死亡仍限制高剂量化疗及造血干细胞移植的临床应用，寻找低毒，有效的靶向天然化学药物是白血病治疗的另一有效途径。.　　　课题组经过深入、仔细研究，共筛选出两种靶向作用NPM1 突变蛋白的天然单体药物---鱼藤素及冬凌草甲素。首次发现鱼藤素对具有NPM1突变的AML细胞具有浓度依赖性的双重作用：在低浓度作用下，鱼藤素可特异性诱导具有NPM1突变细胞系OCI-AML3的分化，该作用可能与特异性下调突变NPM1突变蛋白，激活caspase8及p21、p53及C/EBPα 30kD片段的下调有关；另一方面，NPM1蛋白突变株OCI-AML3对鱼藤素的敏感性明显高于非突变株，而这可能是通过下调NPM-mut及激活caspase-6和caspase-8的共同作用所致。冬凌草甲素则可促进NPM-mut蛋白归位，进一步研究发现冬凌草甲素可能通过上调Nup98的表达及转位使Crm1滞留于胞核，从而降低NPM-mut蛋白的核外转运，p14arf及p53的表达得到稳定，从而起到抗NPMc+ AML的作用。此外，冬凌草甲素可通过激活NF-κB调节OCIM2细胞凋亡，而Nup88和Nup214表达的减少，减缓了此诱导凋亡的作用。鱼藤素和冬凌草甲素这两种天然单体中药靶向NPM1突变蛋白、调控核孔蛋白及NF-κB的效应，为NPMc+ AML的治疗提供了新的治疗思路及新方向，也为急性白血病的治疗开拓了一片全新的领域。