天然多酚化合物黄腐醇抗HCV复制活性研究

无应答、复发或不能耐受药物的毒副作用是丙型肝炎抗病毒治疗亟需解决的问题，探索新的治疗选择是解决这些问题的关键。迄今，尚无丙型肝炎病毒（HCV）的稳定体外培养系统。由于牛病毒性腹泻病毒（BVDV）与HCV在基因组结构和生活周期上的极大相似性，因而被认为是合适的HCV替代模型。我们前期研究显示，多酚类化合物黄腐醇（Xanthohumol）能抑制BVDV RNA复制和包膜蛋白的合成，提示黄腐醇也可能抑制HCV复制。本研究拟利用转染HCV FL-J6/JFH的Huh-7.5细胞系，探讨黄腐醇对HCV RNA、NS3/4A和RdRp的影响以及黄腐醇与IFN-α的协同作用；利用树鼩感染HCV 的动物模型研究黄腐醇在体内的抗HCV作用，旨在阐明黄腐醇在体内、外对HCV复制的抗病毒作用，为开发新型抗HCV药物提供较为系统的实验依据。

在携带HCV RNA复制子的细胞培养系统探讨XN抑制HCV复制的作用。同时，在感染HCV RNA阳性血清的树鼩，评价XN对肝损伤的保护作用以及对氧化反应、细胞凋亡和肝组织中的病毒蛋白表达的影响。.1 . XN抑制HCV细胞培养系统中HCV的复制.以0.2 ％DMSO和500单位/ mL干扰素-α （IFN-α ）分别为阴性或阳性对照，通过检测感染的Huh7.5细胞裂解物和HCV RNA水平在培养物的荧光素酶活性测定确定XN对HCV的抑制作用。与阴性对照组相比，XN在3.53 μM显著降低的荧光素酶活性（ P <0.01）。 XN在7.05 μM进一步减少荧光素酶活性相比， XN在3.53 μM （ P = 0.015） 。 XN在7.05μM或14.11μM可达到与α-2b干扰素相同的抑制效果（P > 0.05）。与阴性对照组相比，XN在3.53 μM显著降低HCV RNA水平（P = 0.001）。虽然XN的结果在7.05 μM有较高的变异， XN在7.05 μM或14.11 μM时使HCV RNA水平降低到了IFN-α的相同水平（P > 0.05）。总之， XN在细胞培养系统显示抗HCV活性，具有潜在地用作抗HCV的一种治疗药物。 .2．XN减弱HCV RNA阳性血清感染树鼩的肝损伤.接种HCV阳性血清中的树鼩的血清转氨酶水平升高，肝组织有炎症，尤其是脂肪肝和HCV核心蛋白的表达。与接种HCV阳性血清而未用XN干预的动物相比，XN 显著降低转氨酶水平，组织学活动性指数，肝细胞脂肪变性评分和肝组织中转化生长因子β1的表达。尽管差异不显著，但与没有XN干预相比，XN能减少HCV核心蛋白在肝组织中的表达。这些结果表明，XN可以有效改善肝脏炎症，脂肪变性和纤维化。.3. XN调节HCV感染树鼩的氧化反应和细胞凋亡.与无XN干预的动物相比，XN显著降低丙二醛，增加超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶，降低Bax表达，促进Bcl-xL和抑制caspase 3的活性。这些结果提示，XN可能主要是通过抑制氧化反应，调节细胞凋亡和肝星状细胞的活化以及可能的抑制HCV在树鼩的复制而发挥其对HCV引起的肝损伤的治疗作用。