维药新疆阿魏抗结肠癌的物质基础及作用机理研究

Ferula sinkiangensis is special precious medicinal resource in Xinjiang drought areas the resin medicine, is common medicine of Uygur and Kazak. Many years clinical application and the domestic and foreign research shows that Ferula sinkiangensis and belong to the plants have a wide range of antitumor activity, but its foundation and function has not systematic reported. This subject gets Ferula sinkiangensis different polarity parts by system solvent extraction method, Colon cancer cell HCT-8 as the research object,Hollow fiber assay inoculating to tumor cell and screening effective parts by inhibition tumor index, Using in situ planting naked mouse to observe effective parts,We test inhibiting tumor rate,the pathology index, tumor microvascular density, at the same time testing routine blood, liver function, kidney function to review its safety, Observing tumor cell proliferation and apoptosis by flow cytometry; On this basis, separating and purificating the effective parts , analysising structure by UV, IR, HPLC-MS, GC-MS, NMR methods. Through this subject,Clarifying the material foundation and function mechanism of Ferula sinkiangensis fighting colon cancer, laying the foundation of developing and utilization ferulic of medicinal materials resources and promoting local economic development, easing patients' pain of all ethnic groups, benefiting local people.

新疆阿魏，是新疆干旱地区特有的宝贵药用资源，其树脂入药，是维吾尔族、哈萨克族的常用药。多年临床应用及国内外研究表明新疆阿魏及同属植物具有广泛的抗肿瘤活性，但其物质基础和作用未见系统研究报道。本课题采用系统溶剂法提取新疆阿魏不同极性部位，以人结肠癌细胞株HCT-8为研究对象，用中空纤维管接种裸鼠，以肿瘤细胞生长抑制率为指标，筛选新疆阿魏抗结肠癌有效部位；通过检测抑瘤率、病理学指标、肿瘤微血管密度，探明有效部位对结肠原位种植转移裸鼠的有效性，同时测定血常规、肝、肾功能，考察其安全性，流式细胞术检测对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响；在此基础上，对有效部位进行纯化分离，UV、IR、HPLC-MS、GC-MS、NMR进行结构解析。通过本课题系统研究，阐明新疆阿魏抗结肠癌的物质基础和作用机理，为我区丰富的阿魏属药材资源开发利用奠定基础，促进当地经济发展，缓解各族患者病痛，造福一方百姓。

新疆阿魏为我国特有品种，只产于新疆。本项目采用极性分离法将新疆阿魏树脂制备成石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇四个部位；应用SRB法、流式细胞术、血清药理学实验筛选出抑制结肠癌活性最好的部位为新疆阿魏乙酸乙酯部位；体外划痕愈合法和Transwell小室法证明新疆阿魏乙酸乙酯部位对结肠癌细胞的迁移和侵袭具有显著的抑制作用；急性毒性实验确定新疆阿魏乙酸乙酯部位的最大耐受量为3.0 g/kg，对小鼠10%的致死量为3.5 g/kg；S-180腹水瘤实验、CT-26实体瘤实验结果表明新疆阿魏乙酸乙酯部位可明显抑制肿瘤的生长，增大了小鼠的脾指数、胸腺指数，但血常规、肝肾功各项指标均正常；BALB/c裸小鼠结肠癌、胃癌移植瘤实验表明新疆阿魏乙酸乙酯部位可以显著抑制肿瘤的生长（P<0.05）；荧光实时定量PCR法和Western Blot检测显示抑癌基因PTEN、P53的表达含量显著增高（P<0.01），Akt、mTOR、Bcl-xl基因的表达含量显著降低（P<0.01），PTEN、p53蛋白的表达含量与空白组比较显著增高（P<0.01），mTOR、Bcl-xl蛋白表达含量显著降低（P<0.01），表明新疆阿魏乙酸乙酯部位通过调控PI3K/Akt信号通路抑制了HCT116细胞的增殖并且促进其凋亡；对新疆阿魏化学成分进行了分离和结构解析，明确了11个化学成分，均为倍半萜香豆素类。. 本项目筛选出了新疆阿魏抑制结肠癌的有效部位，证实了新疆阿魏乙酸乙酯部位具有很好的抑制结肠癌的作用，并阐明了作用机制，搞清了所含化学成分。丰富了抗肿瘤天然药物的研究，为新疆阿魏抗结肠癌的开发奠定了基础，有利于新疆阿魏的合理利用。