SAH后认知障碍和LTP消失：突触重塑相关蛋白的作用机制探讨

蛛网膜下腔出血（SAH）后的认知功能障碍是影响SAH患者预后的重要因素之一，目前发生机制不明，且缺乏有效的干预措施。突触重塑相关蛋白（NR2B、SynCAM1、PSD-95、Syp、SNAP-25、Syt1）是神经元突触可塑性和长时程增强（LTP）形成的基础要件，与学习、记忆密切相关。本研究第一部分拟采用大鼠视交叉池注血SAH模型，结合体外脑片膜片钳和电镜技术，观察不同时间点皮层、海马C1-C3区和齿状回神经通路LTP改变及突触数量的变化，同时评估突触重塑相关蛋白表达，明确两者的相关性。第二部分拟应用NR2B受体拮抗剂和敲除SynCAM1基因干预SAH模型，观察突触数量和三个区域LTP的变化，检测SAH大鼠认知功能障碍的程度，初步阐明NR2B和SynCAM1在SAH后认知功能障碍中的作用机制。本研究从超微结构、电生理和分子生物学三个层面开展研究，将为改善SAH患者预后提供新思路和理论依据。

调整为1年期研究项目，研究内容相应调整。.第一部分：蛛网膜下腔出血（SAH）后突触重塑相关蛋白的表达研究.目的 研究蛛网膜下腔出血（SAH）后突触重塑相关蛋白（NR2B、SynCAM1、PSD-95、Syp、SNAP-25、Syt1）的表达时相和表达区域。方法 42只成年健康雄性SD大鼠，随机分为正常组、对照组、SAH后1、3、5、7、14天，一共7组，取大鼠自体股动脉（尾动脉）非肝素化动脉血注入视交叉池致蛛网膜下腔出血模型。SAH组分别在蛛网膜下腔出血后1、3、5、7、14天后处死大鼠，取颞叶皮层、海马、小脑做标本，Western blot及免疫组化测定突触重塑相关蛋白，采用SPSS12.0软件分析。结果 与正常组相比，对照组无明显差异(P>0.05)；SAH组中SAH后1、3、5、7天的突触重塑相关蛋白水平降低(P<0.05)；SAH后14天的突触重塑相关蛋白水平与正常组相比无明显差异(P>0.05)。结论 突触重塑相关蛋白的表达在SAH后1－3天明显下降，后逐渐上升，至14天时基本恢复正常。.第二部分：NR2B拮抗剂对SAH后大鼠认知功能的影响.目的 观察蛛网膜下腔出血（SAH，subarachnoid hemorrhage）后NMDA受体NR2B亚基的拮抗剂RO25-6981对SD大鼠的认知功能的影响。方法 36只成年健康雄性SD大鼠，随机分为四组：正常组、SAH组、安慰剂组和RO25-6981组，经大鼠自体尾动脉（股动脉）非肝素化动脉血注入视交叉池致蛛网膜下腔出血模型，RO25-6981在造模前30分钟以10mg/kg腹腔注射，后每24h注射一次，在SAH后48小时开始Morris水迷宫试验测试大鼠认知功能能力。结果 与正常组相比，SAH组及安慰剂组的学习记忆功能明显下降（P<0.01），且在SAH组及安慰剂组无统计学差异（P>0.05）。RO25-6891组较正常组、SAH组和安慰剂组的学习记忆进一步显著下降（P<0.01）。结论 RO25-6981可能通过对NR2B受体的拮抗作用来影响蛛网膜下腔出血后大鼠的认知功能。.已根据课题内容，完成全部实验，发表SCI论文5篇，专利1项。