Treg和eHSP70对烧伤大鼠肠道T细胞免疫功能的影响及其在烧伤肠源性感染中的作用

严重烧伤后肠道T淋巴细胞(TC)功能抑制可导致肠道细菌/内毒素移位，是引发脓毒症的重要原因。调节性T细胞（Treg）是一类对细胞免疫具有独特抑制作用的T细胞亚群。热休克蛋白70（HSP70）是细胞在缺血缺氧等应激时诱导产生的一种保护性蛋白质，当其分泌到细胞外，对许多免疫细胞有调节作用。我们在预试验发现严重烧伤大鼠肠道Treg活性显著增强，而eHSP70含量显著降低，但上述变化是否与烧伤后肠道TC功能抑制有关？目前尚不清楚。为此本项目拟观察严重烧伤大鼠肠道eHSP70、Treg和TC变化以及这些变化对肠道细菌和内毒素移位的影响，同时体外观察烧伤大鼠肠道Treg对TC的作用及eHSP70刺激后TC和Treg变化；探讨eHSP70和Treg对TC的影响及其在烧伤后肠道细菌和内毒素移位中的的作用；明确Treg、eHSP70、TC三者间关系。为烧伤后肠粘膜免疫抑制机理及免疫干预提供新的靶点。

目的：观察调节性T细胞(Treg)在严重烧伤大鼠肠道淋巴结中的表达变化，探讨其变化对肠道淋巴结其它T淋巴细胞的影响及其与肠道内毒素/细菌移位的关系。方法：取雄性SD大鼠50只，随机分成正常对照组和烧伤后12、24、36、48h组（各10只），对各烫伤组大鼠背部造成30%全身体表面积III度烧伤；分离肠道淋巴结，采用流式细胞仪技术检测肠道淋巴结Treg、CD3+CD4+/ CD3+CD8+淋巴细胞的表达变化；采用鲎试剂（动态浊度法）检测门静脉血浆内毒素水平及各脏器细菌移位率的变化。结果：（1）烧伤后12、24、36、48h组大鼠肠道淋巴结Treg分别为17.42±1.17、25.65±1.43、36.83±0.68、40.66±0.93，与正常对照组（8.07±0.82）相比表达均升高，差异均有统计学意义（p<0.01）。（2）与正常对照组相比，烧伤后各时相点CD3+CD4+/ CD3+CD8+淋巴细胞比值均明显降低（p<0.05）。（3）烧伤后12、24、36、48h组门静脉血浆内毒素分别为2.21±0.15、5.36±0.15、8.04±0.13、10.89±0.14、较之正常对照组（0.32±0.24）明显升高，差异均有统计学意义（p<0.05）。（4）与正常对照组相比，烧伤后各时相点各脏器细菌移位率逐渐升高（p<0.05）。（5）烧伤后大鼠肠道Treg表达与CD3+CD4+/ CD3+CD8+淋巴细胞比值呈负相关r=-0.827,p<0.01；而Treg水平与门静脉血浆ET水平及各脏器细菌移位率呈正相关r=0.782和0.803,p<0.01。结论：严重烧伤大鼠肠道淋巴结调节性T细胞表达的增加，对肠道其它T淋巴细胞有免疫抑制作用，调节性T细胞在严重烧伤后肠道免疫屏障中可能起重要的作用,与肠道内毒素和细菌移位有着密切的关系。