脑出血血肿成份对水通道蛋白4的影响及相关主要转录调控因子筛选研究

本课题前期工作基础是我们关于凝血酶对水通道蛋白4影响的研究。我们在国际上首次发现凝血酶在体外通过抑制水通道蛋白4表达，并发现蛋白激酶C起中间环节作用。本课题主要观察脑出血时血肿成份对水肿和水通道蛋白4的影响，并利用基因敲除小鼠研究血肿成份产生水肿的机制；并为进一步探讨血肿成份干预脑出血灶周水通道蛋白4表达的分子机制，重点研究星型胶质细胞膜上关键转录因子的调控作用，试图从转录调控因子水平来分析血肿成份对脑出血水肿作用及其分子机制；我们应用蛋白免疫印迹、荧光定量PCR研究水通道蛋白4表达改变；应用蛋白/DNA芯片筛选调控水通道蛋白4表达关键转录因子，应用荧光素报告基因分析血肿成份作用后脑细胞内关键转录调控因子的改变，进而采用RNA干扰技术对筛选出的转录因子进行功能研究，明确其在调控水通道蛋白4及脑水肿的分子生物学机制。