人类不同体液特异microRNAs的法医学探索研究

阐明犯罪现场遗留的人类体液斑痕的组织来源对明确案件性质极为重要。已有的体液斑鉴定方法，包括血清学和mRNA方法有局限性，不适用于法医降解和微量检材。小分子microRNA具有独特优势，更适宜用于降解检材分析。人类不同体液中microRNAs可能存在的差异表达为体液斑痕的组织来源鉴定带来了希望。本课题目的在于：1)探索和寻找具有法医学鉴定意义的,在人类不同体液中差异表达的microRNAs，为不同体液班鉴定提供新的分子生物学标记。2)建立高灵敏度检测微量microRNAs的方法，为在人类不同体液斑中检测微量microRNAs提供新的技术手段。3)阐明不同microRNAs在人类不同体液中表达情况，分析个体之间microRNAs表达差异的定量关系，为进行不同体液斑鉴定奠定基础，为法医生物学证据解释提供科学依据。

阐明犯罪现场遗留的人类体液斑痕的组织来源对明确案件性质极为重要。小分子MicroRNA在不同组织中可能存在的差异表达使它成为体液斑鉴定的潜在标记。本课题采用qPCR-array芯片，从754个成熟MicroRNA 分子中筛选具有法医体液斑鉴定潜在应用价值的MicroRNA，结果发现7个MicroRNA在不同体液中表达差异最明显。它们分别为：静脉血候选标记miR16和miR486、精液候选标记miR888 和miR891a、唾液候选标记miR138-2、月经血候选标记miR214和阴道分泌物候选标记miR124a。为法医MicroRNA体液斑鉴定提供了7个候选标记MicroRNA。采用基于TaqMan探针的实时荧光定量聚合酶链反应（TaqMan-qPCR），成功建立了检测体液斑MicroRNA的方法，为在人类不同体液斑中检测微量MicroRNA提供了新的技术手段。基于效率校正模型计算相对表达率，建立了适用于分析法医物证检材MicroRNA的模式与技术流程。阐明了不同MicroRNAs 在人类不同体液中表达情况以及个体之间MicroRNAs表达差异的定量关系。本研究揭示了MicroRNA可检测性与检材的定量关系，为在初始量不同的检材中定量分析微量MicroRNA提供了技术基础。