表面层层自组装膜载药新型人工晶状体构建及其对LECs增生、迁移和转分化抑制的多重机制和相关信号通路研究

白内障是我国的首位致盲性眼病，晶状体上皮细胞增生、迁移和转分化一直是白内障术后并发症防治研究的难点和热点。本课题拟应用指数增长模式层层自组装和酯化修饰技术，构建前表面缓释溴芬酸钠或二十二烷基磷酸胆碱，后表面组装TGF-beta2抗体多层膜的层层自组装膜载药新型人工晶状体。深入研究：1.表面层层自组装膜载药新型人工晶状体药物缓释速率、理化性质、光学和力学特性；2.应用细胞和分子生物学技术研究溴芬酸钠和二十二烷基磷酸胆碱抑制晶状体上皮细胞增生作用，及其对PKC/ERK和PI3K/Akt信号通路的影响；同时探讨上述药物分别与TGF-beta2抗体联合使用的协同作用及其机制；3.通过活体观察、组织病理和分子生物学检查，观察新型人工晶状体在兔眼抑制晶状体上皮细胞增生、迁移和转分化的有效性、安全性和作用机制。提出表面层层自组装膜载药新型人工晶状体多重机制预防晶状体上皮细胞增生、迁移和转分化的新构想。

白内障术后残余晶状体上皮细胞增生、迁移和转分化是后发性白内障的主要发病机制。本项目应用指数增长模式层层自组装技术成功构建了前表面缓释溴芬酸钠，后表面组装 TGF-beta2 抗体多层膜的层层自组装膜载药新型人工晶状体，以及襻表面载有药物缓释薄层的新型人工晶状体。本研究发现，上述新型人工晶状体的光学和力学特性符合国家检测标准。体外细胞学模型研究显示，溴芬酸钠可以通过JNK/AP-1和GSK-3β/β-catenin信号通路抑制TNF-α诱导的HLEC-B3 细胞增殖和上皮-间充质转分化，还可以通过ERK/GSK-3β/Snail信号通路抑制TGF-β2诱导的HLEC-B3 细胞上皮-间充质转分化。TGF-β2抗体可以通过Akt信号通路抑制TGF-β2诱导的HLEC-B3 细胞上皮-间充质转分化。兔眼后发性白内障动物模型研究显示，新型人工晶体可以显著抑制白内障术后前房炎症反应，以及后囊膜浑浊和纤维化。