益气活血解毒法调控类风湿性关节炎Ths细胞免疫应答网络系统的作用机制

在类风湿性关节炎（RA）启动免疫应答、对病变组织持续免疫攻击，导致慢性、迁延性炎症损伤的进程中，病变组织微环境中Ths细胞效应和抑制的平衡失调，是RA发病及进展的重要病理机制。我们在益气活血解毒方临床治疗RA有效的基础上，以佐剂性关节炎（AA）大鼠为动物模型，利用流式细胞检测术、炎症细胞因子芯片、real-time PCR、ELISA、weatern-blot、病理组织切片等实验技术，研究其调控Ths细胞增殖和分化、干预炎症相关因子正负反馈调节及对炎症信号在Ths细胞内传导效能的影响等方面，多角度、多层次探讨益气活血解毒方恢复Ths细胞免疫应答网络系统动态平衡的作用机制，探寻其干预RA自身免疫应答、缓解持续性炎症损伤的确切治疗靶点，证实益气活血解毒法"恢复循环系统和病变组织微环境Ths细胞效应和抑制的动态平衡"是治疗RA的关键效应机制，为中医药防治RA的研究提供客观可靠的理论和实验基础。

我们提出“恢复循环系统和病变组织微环境Ths细胞效应和抑制的动态平衡是治疗类风湿关节炎（RA）的关键效应机制”的科学假说，以方药与病证相关性的研究方法，以调控Ths细胞增殖和分化、干预炎症相关因子正负反馈调节及对炎症信号在Ths细胞内传导效能的影响为切入点，多角度、多层次探讨益气活血解毒方恢复Ths细胞免疫应答网络系统动态平衡的作用机制，探寻其干预RA自身免疫应答、缓解持续性炎症损伤的确切治疗靶点。研究结果证实，益气活血解毒方可以抑制CIA大鼠病变足跖关节滑膜组织的增生，降低病变组织的炎性物质浸润，控制血管翳的产生，减缓炎性渗出物对病变关节的损伤，使损伤的关节组织得到修复。其主要作用机制在于，调控T、B 和 NK细胞的分化，干预T细胞亚型Th1、Th2 和 Th17的增殖和分化，促进Treg细胞的增殖，恢复T细胞免疫应答网络的平衡机制，从而抑制滑膜细胞的炎性增殖，通过抑制NF-kappaB和 JAK/STAT信号通路的激活，抑制炎性细胞因子的产生和分泌，并抑制病变滑膜组织新生血管的生成，防止形成血管翳，使关节软骨的炎症损伤得到修复，来达到治疗类风湿关节炎的目的。进一步研究发现，该方主要组分忍冬藤的有效成分绿原酸和木犀草素可以通过诱导细胞凋亡来抑制由炎症细胞因子IL-1beta和IL-6等刺激类纤维样滑膜细胞所导致的细胞炎性增殖，其潜在的作用机制是通过调控NF-kappaB和JAK/STAT信号通路的关键分子的表达，抑制信号通路的激活，减缓和阻滞炎症反应的发生，抑制滑膜细胞炎性增殖，来减缓和阻滞RA的疾病进程，达到治疗目的。通过研究益气活血解毒方干预CIA动物模型Ths细胞增殖和分化、炎症相关因子自我反馈调节及炎症信号在Ths细胞内的传导的作用机制，探索益气活血解毒方恢复循环系统和病变组织微环境中Ths细胞免疫应答网络系统动态平衡的作用靶点；证实了“恢复病变组织微环境中Ths细胞免疫应答网络系统的动态平衡是治疗RA的关键所在”的科学假说。益气活血解毒法是以中医学气血毒理论为指导的RA治疗法则，此研究成果可以为深入研究中医学气血毒理论与自身免疫应答反应相关性，探讨中医学气血毒理论的客观物质基础，提供科学客观的实验基础，丰富传统中医理论的科学内涵，为中医药防治自身免疫性疾病的研究提供可供参考的研究思路和方法。