益气活血解毒方对慢性心衰的DC-exos-T细胞活化的作用机制

Chronic heart failure（CHF）has become a major global public health problem. CHF involved in chronic inflammatory infiltration for a long time. with the inflammatory accumulated, it makes the condition worse because of the "Inflammation waterfall" effect. Dendritic cell play an important role in the pathogenesis of cardiovascular diseases. Yiqi Huoxue Jiedu decoction could alleviation endothedial activation, reduce the immune inflammation in the peripheral, and improve cardiac function. these effect have a relationship with DC-exos transfer message. This study will reveal the DC-exos function and the affections of Yiqi Huoxue Jiedu decoction though flow cytometry, immunofluorescence, confocal microscopy,q-PCR and Western Blot et al, in vivo and in vitro. DTR and C57BL/6 mice with CHF by transverse aortic constriction (TAC) will be observe the correlation among DC-exos, endothedial function and CD4+T cell expression in vivo. DC, and DC-exos from induce by HUVECs respectively co-culture with CD4+T cell to discuss transfer function of DC-exos between CD4+T cell and negative inflammation produced by CD4+T cell, and Yiqi Huoxue Jiedu decoction regulating effect.

慢性心力衰竭（CHF）已成为全球重要的公共卫生问题。由于长期处于慢性炎症状态，随着炎症因子积累，致“炎症瀑布”效应使病情发展恶化。树突状细胞外泌体（DC-exos）在心血管疾病免疫炎症中起了重要作用。益气活血解毒方降低CHF外周血免疫炎症因子，调节内皮激活、调节T细胞（CD4+T细胞）表达，改善心功能与DC-exos交通作用有关。本项目将从体内和体外两个层面研究，采用细胞流式术、免疫荧光、共聚焦显微镜、q-PCR以及蛋白质印迹等方法，阐述DC-exos在压力负荷CHF的作用机制及益气活血解毒方的调控作用。采用C57BL/6小鼠和DTR小鼠，TAC致CHF小鼠模型，明确DC-exos与内皮功能和CD4+T细胞表达的关系。基于DC及不同刺激得到的DC-exos分别和CD4+T细胞共培养，探讨DC-exos在细胞间的交通作用以及对CD4+T细胞活化及炎症因子的影响以及益气活血解毒方的调节作用。

慢性心力衰竭一直是患病率高、病死率好，预后差，根据最近研究显中国慢性心力衰竭增长全球第一。主要是由于高血压是最主要因素之一。降低心衰患者再住院率和远期终点事件发生率仍是现在面临的严峻挑战。本项目采用益气活血解毒发代表方暖心康方干预TAC压力负荷模型小鼠，模拟高血压所致的压力负荷所致慢性心力衰竭情况，研究免疫炎症发生相关机制，以及中医药干预作用机制。本项目自立项以来，严格按照项目任务计划完成研究任务：.2018年：完成压力负荷心衰小鼠模型建立，树突状细胞在慢性心衰心脏微环境中的浸润、DC-exos在心脏微环境中的表达、内皮细胞功能和T细胞表达研究。.2019年：完成益气活血解毒方对于压力负荷心衰小鼠模型DC-exos 的调节，对内皮细胞功能和T 细胞表达研究。.2020年：完成慢病毒构建siICAM-1 HUVECs 细胞；DC与CD4+T细胞共培养，探讨益气活血解毒含药血清干预对DC-exos 分泌影响的作用机制及DC-exos对T细胞影响的作用机制研究。.（2）研究目标完成情况.本项目研究证实了DC在TAC压力负荷小鼠心脏微环境的浸润及分泌DC-exos，且与内皮功能的激活和CD4+T 细胞激活具有相关性。益气活血解毒解方（暖心方）可调节该作用过程，从而改善心功能以及心肌细胞结构。DC与CD4+T细胞之间有DC-exos作为载体传递信息，并且与内皮激活的ICAM-1密切相关，益气活血解毒方（暖心方）对CD4+T细胞的极化具有调控作用，可减少其分泌不利心脏的炎症因子，在调整抗炎因子和促炎因子方面可能存在存在有双心调节作用，具有改善心功能，延缓心脏组织重构。.项目执行期间发表慢性心力衰竭相关论文5篇，已经接受1篇，已发表4篇，其中SCI收录论文2篇；国际会议摘要1篇；与本项目直接相关论文2篇，1篇录用，1篇发表，实验数据正在撰写论文，准备投稿中。作为编委参与编写著作4部。培养博士研究生3名和硕士研究生2名，顺利完成研究目标计划。