锯缘青蟹性别决定和性腺发育分子机制的基因芯片分析

通过收集不同发育时期雌雄青蟹的性腺和其它组织，分离RNA,构建线性化cDNA文库，印制成高表征青蟹性腺cDNA 芯片（微列点阵），并应用不同发育时期雌雄青蟹的性腺mRNA探针和来源于其它组织（对照组）的mRNA探针，用双色荧光标记，设计成不同的探针对分别与高表征青蟹性腺cDNA 芯片杂交，经高通量分析度量差异表达斑点和测定相应斑点的cDNA序列，采用定量PCR或Northern杂交验证与对照组具有差异表达的性腺发育相关基因的表达水平。对一些重要的功能基因采用Race方法调出其全长cDNA。进一步结合染色体步行等方法从基因组DNA中调出相关基因的表达调控元件。最终获得一批与青蟹性别决定、生殖细胞发生和性腺发育相关基因并构建成这些基因的表达谱系以在全基因组水平阐释锯缘青蟹性别决定和性腺发育的分子机制。