PPARγ磷酸化失活在血管衰老中的作用及机制研究

随血管增龄性重构的发生发展，血管组织内存在抗衰老因子PPARγ逐渐失活的现象。基于衰老的RAS理论，我们已证实Ang II可致PPARγ失活。磷酸化是新发现的Ang II致PPARγ失活的重要机制，而血管平滑肌细胞（VSMCs）的异常衰老及凋亡是血管衰老的重要细胞学基础，结合近期预实验结果，我们推测PPARγ磷酸化失活可能参与VSMCs异常衰老及凋亡过程，并在血管衰老的发生发展中起重要作用。为证实以上假说，本课题拟首先通过体外研究观察Ang II诱导VSMCs衰老及凋亡过程中是否存在PPARγ磷酸化失活；继而应用RNAi、质粒转染等技术探讨PPARγ磷酸化失活对VSMCs衰老及凋亡的影响，并探讨其可能机制；最后在动物模型上最终揭示PPARγ磷酸化失活在血管衰老中重要作用及其调控机制。本课题的实施将有助于揭示PPARγ在血管衰老过程中的关键地位，并为以PPARγ为靶点预防血管衰老提供理论依据

我们的前期研究表明随血管增龄性重构的发生发展，血管组织内存在抗衰老因子PPARγ逐渐失活的现象。本课题应用基因工程方法，real-time RT-PCR，Western blot，免疫细胞化学，ELISA等方法取得如下成果：① Ang II 诱导VSMCs衰老、凋亡及炎症因子释放过程中，存在PPAR-γ表达降低及磷酸化失活；② PPARγ可显著抑制Ang II诱导的VSMCs衰老、凋亡及炎症因子释放；而这一作用可能是通过抑制TLR4/Myd88/NF-κB通路实现的；③ 随血管衰老程度增龄性不断进展；血管组织中 PPARγ表达及活性随龄下调，PPARγ磷酸化程度随龄增加；④ PPARγ激动剂显著抑制血管衰老的进展； ⑤ 高血压进程中存在大脑特定区域神经元凋亡增加的现象，而PPARγ激动剂可通过抑制炎症反应下调神经元凋亡的发生；⑥姜黄素可通过抑制TLR4/Myd88/NF-κB通路抑制LPS诱导的VSMCs炎症因子释放。⑦ 肥大细胞激活后存在TLR4表达上调现象；而抑制TLR4表达可显著抑制肥大细胞活化。本课题的完成将有助于揭示PPARγ在血管衰老过程中的关键地位，并为以PPARγ为靶点预防血管衰老提供理论依据。