lnc-AIFM2-1作为ceRNA介导miR-330-3p调控CD244在HBV免疫逃逸中的作用研究

Previous results of our group indicated over-expression of coinhibitory molecule CD244 was associated with HBV persistence, but the mechanism was unclear. miR-330-3p was reported to target CD244, thus induce CTLs function exhaustion and HBV immune escape. Newly studies reported lncRNA can act as ceRNA, interact with microRNA, mediated disease progress. Our bioinformatics predict and chip screening results indicated lnc-AIFM2-1 was significantly higher in chronic HBV infected patients, and it can target to miR-330-3p. We speculate Lnc-AIFM2-1 contributes to over-expression of CD244 by acting as a ceRNA against miR-330-3p in HBV immune escape. This study aims to find new biomarkers for HBV infection by kinds of molecular biological techniques such as RT-PCR、siRNA、Western blot and so on.

课题组前期发现负性分子CD244的高表达与HBV持续感染有关，调控CD244的关键分子可能成为HBV感染慢性化的新标志物。结合最新研究和前期试验推测miR-330-3p可能通过结合靶基因CD244介导HBV免疫逃逸。根据最新热点：lncRNA可作为ceRNA竞争性结合microRNA影响疾病进展，课题组通过生物信息学预测、lncRNA芯片及定量，推测lnc-AIFM2-1竞争性结合miR-330-3p，减弱后者对CD244的抑制，介导CTLs功能耗竭及HBV免疫逃逸。课题组拟分析慢性HBV感染者及自发清除者lnc-AIFM2-1、miR-330-3p及CD244的表达，并用siRNA等技术在细胞和小鼠模型验证。预期将揭示，lnc-AIFM2-1作为ceRNA介导miR-330-3p调控CD244表达，介导HBV感染慢性化，对研究表观修饰在HBV免疫逃逸中的作用和探寻新靶标具有重要意义。

HBV感染是导致各种终末期肝病的重要原因，由于缺乏高效能的抗病毒药物及诱导宿主特异性免疫应答的制剂，彻底清除HBV及治愈各类慢性肝病仍然是乙肝治疗的难题。HBV感染慢性化的关键因素是细胞毒性T细胞的功能耗竭，而负性共刺激信号分子的过度表达在导致CTLs细胞功能耗竭中发挥了重要作用。因此，探寻细胞免疫调控的关键信号分子，可以为寻找HBV感染相关生物标志物和治疗靶点提供新的思路。课题组收集慢性乙肝患者和自发清除者进行分析，发现负性分子CD244在慢性乙肝组表达显著增高，通过生物信息学预测、lncRNA芯片及定量验证，发现miR-330-3p在慢性乙肝组显著降低，而lnc-AIFM2-1显著增高，根据最新热点：lncRNA可作为ceRNA竞争性结合microRNA影响疾病进展，课题组推测lnc-AIFM2-1竞争性结合miR-330-3p，减弱后者对CD244的抑制，介导CTLs功能耗竭及HBV免疫逃逸。采用基因过表达、siRNA等技术，通过细胞模型进行体外试验，证实lnc-AIFM2-1作为ceRNA介导miR-330-3p调控CD244表达，导致HBV感染慢性化，从细胞和整体水平阐明ncRNA调控宿主细胞免疫功能，介导HBV病毒免疫逃逸和感染慢性化的分子机制，为寻找新的分子靶点，研发针对靶点的阻断剂，恢复耗竭T细胞的抗病毒功能提供新的思路，具有重要的临床应用价值。