施万细胞诱导JAM-B/C依赖性胰腺癌神经归巢转移及其机制研究

Perineural metastasis is a prominent characteristic of PanCa. To the best of our knowledge, no generally accepted mechanisms (with respect to PNI) have been established. The interaction of junctional adhesion molecules B/C (JAM-B/C) is involved in cancer homing metastasis. We present the hypothesis that JAM-B/C could contribute to the directional PNI of PanCa cells through gradual processes. First, the high expression of JAM-B of PanCa cells indicates that there is no directional invasion ability, which provides an original dynamic for the generation of PNI in PanCa. Second, the expression of Schwann cells in JAM-C exerts chemotaxis to the JAM-B positive PanCa cells and encourages the latter to migrate to the peripheral nerves, thereby promoting the generation of PNI in PanCa. Finally, the heterotypic adhesion of JAM-B/JAM-C promotes a solid adhesion between the PanCa cells and nerves; this adhesion activates the pathways regulating cell migration and invasion and promotes the development of PNI in PanCa. The mechanism behind how the JAM-B/JAM-C signal pathway participates in PanCa with PNI remains to be determined. It is important to investigate the relationships among PanCa and the JAM-B/JAM-C signal pathway and Schwann cells. This investigation would likely provide a new mechanism for the PNI in PanCa.

针对胰腺癌神经浸润和转移机制未明的难题，依据接合粘附分子B/C（JAM-B/C）介导了多种肿瘤归巢转移的现象,提出施万细胞通过JAM-B/C异质性粘附介导了胰腺癌细胞神经归巢转移的新设想。运用免疫病理，组织形态学，细胞和分子生物学技术，从临床水平分析JAM-B/C的特异性表达及细胞定位与胰腺癌神经浸润与恶性预后之间的关系；应用基因导入，基因沉默技术构建JAM-B高表达及不表达细胞株，通过癌细胞－施万细胞三维共培养及裸鼠胰腺癌神经浸润模型等重建肿瘤微环境，应用PCR、Western blot 、细胞行为检测、小动物活体成像和神经功能检测等方法，从体外细胞和动物活体内等层面，检测施万细胞在癌细胞实现定向迁移-牢固粘附-激活换能-二次转移的阶梯式神经归巢转移中的作用，进一步阐明JAM-B/C及其下游转移信号通路在其中的核心作用，为胰腺癌神经浸润发生发展的机制研究及治疗提供新的研究思路和实验模型。

课题组围绕JAM-C依赖性的施万细胞在胰腺癌神经浸润的发生发展中发挥“癌细胞神经归巢” 的作用进行了深入研究，分别从临床病理，体外实验以及体内实验逐层深入进行论证。.首先，通过临床病理研究，初步探讨 JAM-B,JAM-C 在胰腺癌组织中癌细胞及神经组织中的表达和定位情况，明确此表达特点与神经浸润进展及患者临床分期之间的关系，初步确定JAM-B/C 在胰腺癌神经浸润中的作用;..其次，通过体外实验，建立胰腺癌细胞-神经节，胰腺癌细胞-施万细胞三维立体肿瘤微环境，动态观察 JAM-B/C 信号对癌细胞神经定向生长的影响的动态过程，及分子水平指标的变化;并进一步研究 JAM-B/C 的异质性粘附对 JAM-B+/-癌细胞极性相关蛋白，肿瘤侵袭相关因子 Src，MMP-2、MMP-9、E-Cadherin 等的表达影响。从体外验证 JAM-B/C 信号在癌细胞“归巢”转移中的作用及其潜在的分子机制。.最后，通过裸鼠胰腺癌坐骨神经浸润模型，验证体外实验结果，并给予Src抑制剂后观察神经浸润的变化情况及分子水平的差异。. 目前该课题已基本完成计划，培养硕士研究生1名，参与培养博士研究生1名，研究成果已发表核心期刊收录的文章 5篇，主要研究结果已基本完成数据整理及文章撰写，2篇文章拟投稿于SCI收录杂志。阐明JAM-B/C 信号在癌细胞“归巢”转移中的重要作用， 对胰腺癌神经浸润的机制研究供了理论及实践依据，具有重要的理论及临床价值。课题的研究成果已经得到国内外学者的广泛认可，课题的研究成果具有广泛的推广和应用价值。