昆仑雪菊降压化学成分靶向分离鉴定与分子作用机制研究

Coreopsis tinctoria is a rare alpine wild plants possessed unique function, macthed with Saussurea involucrata only in Xinjiang. It is of significant antihypertensive pressure activity due to growing in special environment suc high altitude, hypoxia, It has become a specical drinks used for both food and medicine with the effective treatment after drinking and heritage in ethnic minorities for generations.It has not been extensive research and development over the years because it is not easy to harvest owing to growing in special environment and lack of publicity. In this study, targets the ACE and ACE2, it will be isolated and identified the antihypertensive active ingredients by a bioassy-guide method from coreopsis tinctoria which is used as experiment materials, assisted with ultrasonic extraction, solvent extraction and a variety of column chromatography.On the base of the result, using a hypertensive SHR rats model, combined with molecular biology methods, From genes, proteins, and molecular levels, we will study the ACE-inhibition effects to mRNA and protein expression of SHR rat as well as Ang II, elucidate the molecular mechanism of action, make the foundation for the development of national functional foods with independent intellectual property, the resut will have original innovation.

昆仑雪菊是目前新疆唯一与雪莲齐名，具有独特功效的稀有高寒野生植物。因为其特殊生长环境（高海拔、缺氧）而具有显著的降血压活性，经过少数民族世代饮用与传承，已经成为疗效显著的维吾尔族食药两用的饮品。由于生长环境特殊，采摘不宜，加之宣传不足，多年来一直未得到深入研究与开发。本研究以ACE为靶点，以昆仑雪菊为原料，采用活性追踪的方法，辅助超声萃取、溶剂浸提与多种柱层析方法，从中分离鉴定降血压活性成分,在此基础上，以高血压SHR鼠为模型，结合分子生物学方法，从基因、蛋白和分子水平上，研究具有ACE抑制作用的单体化合物对SHR大鼠 ACE、 ACE2 的 mRNA 及其蛋白表达与AngⅡ的影响，阐明分子作用机制，为开发具有自主知识产权的民族功能食品奠定基础，具有源头创新。

昆仑雪菊是我国新疆地区具有民族特色的食药两用植物，主要分布在和田喀喇昆仑山脉海拔3 000 m 以上高寒地区，因此又被称为天山雪菊和高寒香菊。长期以来，昆仑雪菊都被当地居民当花茶饮用，经世代传承，发现其具有清热解毒、和胃健脾、活血化瘀等功效，尤其是降血压活性尤为显著，因也被称为“降压雪菊”，然而对其化学成分的研究鲜有报道。因此，深入研究昆仑雪菊的化学成分及其降血压作用机制，对于开发这一稀有资源的食用和药用价值具有重要意义。.（1）优化了游离型和结合型昆仑雪菊降血压活性成分提取的溶剂，获得了最佳提取参数。其中游离型降血压活性成分的最佳提取溶剂为甲醇，结合型降血压活性成分的最佳碱降解时间为2 h、温度50 ℃、NaOH浓度2 mol/L，最佳提取溶剂为正丁醇。.（2）昆仑雪菊降血压活性成分的分离鉴定。从昆仑雪菊中分离鉴定了21个化合物，其中有5个新化合物，包括3个新黄酮化合物和2个烯炔糖苷化合物。另外还有16个已知化合物。.（3）昆仑雪菊降血压单体成分活性评价。抗氧化活性研究结果表明，昆仑雪菊中的主要抗氧化活性成分为黄酮类化合物；ACE酶抑制活性研究结果表明，新化合物coretincone 和 已知化合物taxifolin、咖啡酸甲酯,异奥卡宁-7-O-β-D－吡喃葡萄糖苷和香豆酸甲酯具有较强的ACE酶抑制活性，可能是昆仑雪菊中的主要降血压活性成分。.（4）昆仑雪菊活性成分作用机制研究。ACE酶抑制活性表明，黄酮类化合物是昆仑雪菊中的主要降血压成分，体外降血压机制研究表明，昆仑雪菊的降血压机制主要是通过抑制ACE酶活性降低血压的。.（5）昆仑雪菊单体化合物相互作用研究。选取昆仑雪菊中5 种具有强抗氧化活性的黄酮类化合物研究其抗氧化相互作用。结果表明昆仑雪菊中黄酮类化合物之间的抗氧化相互作用关系与化合物的结构和浓度有关。.上述研究结果阐明了昆仑雪菊中的主要降血压物质，初步阐明了降血压机制，为开发具有自主知识产权的民族功能食品奠定基础。