新疆雪菊调节血脂的药效物质基础及作用机制研究

The flowers of Coreopsis tinctoria Nutt have been widely applied as a herb tea in Xinjiang area in history, The health function of Coreopsis tinctoria Nutt, such as anti-atherogenic hypolipidemic, hypotensive hypoglycemicand and anti-obesity effect, has attracted much attention, however, the bioactive ingredients and their regulating blood lipid mechanisms remains unclear. In our previous study, the chemical ingredients of the flowers of Coreopsis tinctoria were isolated and identified as maresin,flavanomarein and other 8 flavonoids, the total flavonoid fraction (CTE) was extracted successively, with maresin and flavanomarein as major constituents.CTE showed positive effects of regulating blood lipid on a hyperlipidemia mice in vivo, and strong antioxidant capacity in vitro. The current research will explore its function of regulating blood lipid and the underlying mechanisms of CTE, including lipid metabolism pathways and anti-oxidative damage. Serum pharmacology and medcinal chemistry methods will help to explore the mechanisms and active ingredients. The research will provide the substantial academic basis for the folk experiences of the flowers of Coreopsis tinctoria as herbs of regulating blood lipid. The regulation mechanism will be elucidated. This research will promote further utilization and development of this precious natural resource.

雪菊是具有新疆区域特色的新资源药材，民间作为花茶饮用，认为具有降脂、降压、降糖等功效，近年来引起学者重视和研究，但其调脂的机制以及相关的物质基础尚未明确。我们在前期工作中，对雪菊提取物中的马里苷、黄诺马苷等12种主要成分进行了分离鉴定，对其总黄酮提取物进行了制备和含量分析；高脂血症小鼠模型预实验结果证明，雪菊总黄酮具有明确的调血脂作用；雪菊总黄酮和马里苷均具有显著的体外抗氧化活性。 在此基础上，本课题计划以雪菊总黄酮及其中的指标性成分为研究对象，采用实验性高脂血症动物模型测试雪菊提取物对高脂血症的防治作用，从脂质代谢调节和抗氧化损伤等方面来探讨其可能的作用机制；采用血清药理学与血清药物化学方法相结合，研究雪菊提取物调节血脂的作用机制及其药效物质基础。通过上述整体动物、细胞和分子水平的多学科集成研究，首次阐释雪菊调节血脂的作用机制及相关物质基础，为新疆雪菊的进一步开发应用提供重要科学依据。

雪菊是具有新疆区域特色的新资源药材，民间作为花茶饮用，认为具有降脂、降压、降糖等功效，但其调脂的机制以及相关的物质基础尚未明确。本课题以雪菊总黄酮（CTE）及其中的主要成分为研究对象，对雪菊提取物调节血脂的药效物质基础进行探索研究，取得的主要成果如下。 （1）采用75%乙醇提取、AB-8树脂精制获得CTE，从中分离鉴定出主成分黄诺玛苷、马里苷及其苷元；经液质联用分析，表明其中含有黄酮、绿原酸等12种主要成分。采用单因素考察结合响应面法优化雪菊总黄酮的提取工艺，对黄诺马苷、马里苷在含水溶剂中存在的Wessely–Moser动态平衡现象进行了定量分析。（2）采用高脂乳剂诱导高脂血症小鼠模型，考察CTE对动物脂质代谢的影响,结果显示CTE可降低小鼠血清中甘油三酯、总胆固醇水平，表明CTE对高脂乳剂诱导的血脂异常有一定的调节作用，部分机制可能与其缓解氧化应激/脂质过氧化损伤、下调ADRP的表达有关。另一方面，采用油酸诱导的脂肪变性HepG2细胞模型，考察CTE和马里苷、黄诺玛苷对其脂质代谢的影响，结果发现CTE可显著降低其甘油三酯，马里苷是主要有效单体成分，其机制可能通过上调PPAR，从而抑制DGAT的表达、减少细胞内甘油三酯合成，同时增加CPT1A的表达、促进脂肪酸β氧化而减少游离脂肪酸含量。（3）采用体外模拟消化道代谢实验，研究CTE及其主成分黄诺玛苷、马里苷的代谢途径，首次发现马里苷在人工肠液和弱碱性条件下容易转化为海生菊苷和黄诺玛苷。采用正常大鼠口服给药CTE，经液质联用分析，表明其主要成分黄诺玛苷、马里苷在小肠内快速水解生成相应的苷元异奥卡宁、奥卡宁以及苷元的葡萄糖醛酸和硫酸酯结合物；有少量苷元及其葡萄糖醛酸酯结合物被吸收入血；马里苷在肠道中也有部分转化为海生菊苷。 通过上述研究，初步阐释雪菊调节血脂的作用机制及相关物质基础，为雪菊的进一步研究与开发应用提供科学依据。