原发性胆汁性肝硬化患者B细胞和肝组织中microRNA的异常表达及临床应用

The pathogenesis of primary biliary cirrhosis (PBC)remains unclear. The rescent study indicates B cell function is involved in the early stage of PBC.Our previous study showed that the degree of the B cell infiltrating and the bile duct damage around the portal areas was significantly milder in anti-mitochondrial antibodies (AMA)(+) PBC than those seen in AMA(-) PBC patients.The portal areas from AMA(-) patients had a significant increase of CD5(+) cell infiltrating the ductal regions and the levels of B cell infiltrates were worse in the early phase of bile duct damage.The results indicate the autoimmune of B cells plays an regulatory role in the pathogenesis of PBC.microRNAs are a class of small noncoding RNAs which regulate the gene expression at the post-transcriptional stage, and involved in the regulation of B cell function. The dysfunction of B cells may be related to the abnormal expression of the microRNAs. This study are to check the microRNA expression of liver tissue of the PBC patients before and after treatment, and also the microRNA expression, subset classification,and function of the circulation B cells, to study the role of the microRNA expression in the diagnosis and the prognosis of the response to treatment of PBC patients.

原发性胆汁性肝硬化（PBC）的发病机制尚不明确，近期研究发现B细胞可能参与到其发病机制中。我们的前期研究发现抗线粒体抗体（AMA）阳性的PBC患者肝组织中早期B细胞浸润和汇管区附近的胆管破坏程度都比AMA阴性患者的轻微，AMA阴性患者在胆管破坏早期汇管区B细胞和CD5+细胞浸润均明显增加，提示B细胞自身免疫对PBC特异性汇管区破坏的调节作用，而其他B细胞相关研究也提示了B细胞在PBC发病过程中的调节作用。microRNA是一组小分子非编码RNA，参与转录后基因表达调控，涉及B细胞多种功能的调节。B细胞的功能异常可能与microRNA的异常表达相关。本研究拟检测PBC患者治疗前后肝组织microRNA的表达，以及循环和肝组织中浸润的B细胞分期、亚群以及功能检测、microRNA表达等信息，研究microRNA对于PBC诊断及治疗应答预测中的作用。

原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC），现又称原发性胆汁性胆管炎（primary biliary cholangitis，PBC）是一种以慢性进行性胆汁淤积为特征的自身免疫性肝脏疾病。近期研究发现，AMA阳性和阴性患者肝脏组织的B细胞浸润程度不同，提示B细胞在PBC发病过程中对于PBC特异性的门脉区破坏具有调节作用。微小RNA即microRNA（miRNA）是近年来发现的一类在转录后水平对目的基因的表达进行调控的非编码RNA。microRNA控制多种免疫细胞亚群的分化和免疫功能，参与B细胞发生、发展的不同阶段的调控。本研究通过对疾病各时期的PBC患者及健康对照者外周血B细胞中microRNA谱进行检测，筛选特异性表达改变的microRNA，明确microRNA与PBC疾病进展是否有关及可能的机制。.本研究收集32例PBC病人包含I-IV期患者外周血，选择年龄无差异的健康对照4例。提取外周血B淋巴细胞，提取RNA 后进行microRNA芯片，通过统计学方法计算出差异表达的microRNA。与健康对照组相比，PBC患者外周血B细胞中共有558个microRNA存在差异表达。其中表达差异倍数大于20的microRNA有30个，其中24个上调基因，6个下调基因。在四期中均有差异表达且随病理分期加重逐渐下调的有三个microRNAs(hsa-miR-3196, hsa-miR-223-3p, sa-miR-21-5p)。在8例健康对照组和37例各期PBC患者进行选取部分micro RNA 进行real-time PCR验证，其结果与芯片结果保持一致。从而说明microRNA芯片表达谱的准确性。.研究结论：原发性胆汁性肝硬化患者外周血B细胞中存在多种microRNA的差异表达。原发性胆汁性肝硬化病理分期不同，外周血B细胞中差异表达的microRNA种类存在不同。hsa-miR-4770和hsa-miR-148a-3p只在I期PBC患者外周血B细胞中差异表达，且表达明显上调。hsa-miR-3196,hsa-miR-223-3p, sa-miR-21-5p随PBC病理分期加重逐渐下调的,可能参与了PBC的发病机制。