百合ACC合成酶反义基因构建及其遗传转化

于百合呼吸跃变期提取总RNA，纯化mRNA；据已发表的植物1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶（1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase, ACC合成酶）基因的保守序列，设计合成特异引物，通过反转录PCR获得特异cDNA片段，连接pGEM-T Easy载体，克隆、测序并与GenBank中已有的ACC合成酶基因cDNA及氨基酸序列进行比较分析，确定ACC合成酶基因功能，登录GenBank；构建ACC合成酶反义基因表达载体；采用农杆菌介导法，将ACC合成酶反义基因导入百合栽培品种中去，并采用PCR、Southern blot及Northern blot进行分子鉴定；通过田间测定乙烯和开花期观测，最终获得延长开花期的百合新品系2-3个。