基于IL-6/STAT3通路的片仔癀治疗结肠炎相关性结肠癌的机制研究

结肠炎相关性结肠癌（colitis-associated cancer, CAC）的发病率逐年上升，因此，深入探讨CAC的发病机制，寻找安全有效的靶向药物显得日趋重要。最新研究表明，结肠上皮细胞IL-6/STAT3信号通路的激活与CAC的发生密切相关，这一发现为CAC的药物治疗提供了新的研究方向。传统名贵中药片仔癀对结肠癌的疗效明确，但其作用机制不甚明了。我们的前期研究发现片仔癀能显著下调结肠癌细胞IL-6/STAT3通路重要靶基因Pim-1、Bcl-2及CyclinD1等的表达。本课题在此基础上以AOM/DSS诱导的小鼠CAC模型和结肠癌细胞Caco-2为研究平台，运用基因克隆、细胞转染、RT-PCR、Western Blot等方法系统地研究片仔癀对CAC的治疗作用和对结肠上皮细胞IL-6/STAT3通路的影响，以阐明其治疗CAC的分子机制和作用靶点，为临床应用提供实验理论依据。

本研究采用腹腔注射氧化偶氮甲烷及饮用葡聚糖硫酸钠的方法，以及体外培养人结肠癌Caco-2及HT-29细胞、待其分化后加以IL-6刺激，从而建立结肠炎相关性结肠癌（CAC）小鼠及细胞模型。通过对上述模型的干预研究片仔癀治疗CAC的作用机制及靶点。动物实验结果显示片仔癀能够显著降低CAC模型小鼠成瘤率、降低疾病活动指数、抑制小鼠结肠的缩短、改善结肠炎症损伤、降低血清和组织中炎症因子IL-6和血清淀粉酶（serum amylase，SAA)的表达水平以及STAT3的磷酸化；细胞实验发现片仔癀能够抑制IL-6刺激后结肠上皮细胞STAT3的磷酸化及转录活性。体内外实验均证实片仔癀可显著抑制STAT3通路关键靶基因Bcl-2、CyclinD1、Pim-1的表达。研究结果表明“抑制IL-6/STAT3通路”可能是片仔癀治疗CAC的一个重要机制。.另外，在此基础上课题组还通过制备结肠癌皮下移植瘤裸鼠模型以及体外培养多株结肠癌细胞株对片仔癀抗结肠癌作用机制进行了进一步的研究。研究表明片仔癀：（1）可显著抑制荷瘤小鼠体内的肿瘤生长，且无明显毒副作用；（2）可明显降低多种结肠癌细胞株的活性；（3）可调节Bcl-2家族的表达、降低线粒体膜电位，进而激活caspases级联反应并最终诱导结肠癌细胞的凋亡；（4）可抑制CyclinD1、CDK4的表达，阻止细胞周期G1/S转换，从而抑制大肠癌细胞的增殖；（5）可抑制VEGF-A和VEGFR2的表达，发挥抗肿瘤血管新生的作用；（6）可抑制STAT3、PI3K/Akt、ERK、p38和JNK等多条结肠癌相关细胞信号通路的活化。研究结果证实了片仔癀治疗肿瘤具有多靶点、多途径的特点。在本基金项目的资助下，课题组已发表片仔癀相关论文13篇，其中SCI源论文8篇。