茶多酚提取物EGCG抑制NF-κB途径保护高尿酸血症所致血管内皮损伤的研究

高尿酸血症是遗传与环境因素相互作用引起的与生活方式密切相关的代谢性疾病，还与冠心病、高血压、脑卒中、糖尿病、肥胖、代谢综合征等疾病密切相关。尿酸导致血管内皮炎症反应是高尿酸血症相关疾病的发病基础。茶多酚提取物EGCG除了抑制黄嘌呤氧化酶，还能抗血管壁炎症。本项目在前期茶多酚改善高尿酸血症人群研究基础上，采用尿酸酶抑制剂和尿酸联合诱导的鼠高尿酸血症模型，以及尿酸诱导人脐静脉细胞实验中观察EGCG对尿酸所致血管内皮炎症的保护作用；运用免疫组化、RT-PCR、Western blot等分子生物学技术观察内皮细胞炎症反应NF-κB途径中、COX-2、MCP-1、ICAM-1、TNF-a和内皮细胞标志物ET-1、vWF、NO 表达；同时测定内皮细胞舒张功能，从整体、细胞水平阐明EGCG保护高尿酸血症所致血管内皮细胞损伤的可能机制，为临床治疗高尿酸血症相关疾病积累资料及提供新的思路。

尿酸所致的血管内皮炎症反应和氧化损伤是高尿酸血症在冠心病、高血压等疾病中的发病基础。茶多酚提取物EGCG具有较明确的抗炎和抗氧化的作用。但是尿酸以及EGCG对血管内皮作用的具体机制仍然不清楚。本研究利用siRNA、重组质粒等分子生物学技术，从体内和体外实验中试图阐明这一可能的机制。本研究首先在HUVEC细胞中给予尿酸刺激，发现HUVEC细胞的增殖能力明显受到抑制，并且增强了NF-κB以及其下游炎症因子（MCP-1、ICAM-1、TNF-a）的表达。EGCG干预后不仅减弱了尿酸对于HUVEC增殖抑制的作用，而且显著降低上述这些炎症因子的mRNA表达。EGCG已明确是NF-κB的抑制剂，故体外实验表明EGCG改善尿酸所致HUVEC的炎症因子表达可能是通过抑制NF-κB所实现的。这种作用在高尿酸血症动物模型的干预实验中也证实，在添加了EGCG后可导致高尿酸血症大鼠的血尿酸及黄嘌呤氧化酶的水平显著下降，主动脉中NF-κB、MCP-1、ICAM-1、TNF-a炎症因子其mRNA水平也显著下降。其次我们发现尿酸还可增加HUVEC细胞的ROS水平，并且影响其血管形成的能力，EGCG干预后则显著降低HUVEC中ROS水平，同时提高HUVEC的分化及粘附作用，促进血管形成。最后我们初步在HUVEC细胞中进一步探讨发现尿酸还可激活Notch1基因的表达，Notch1基因表达量与尿酸有剂量-时间效应关系，并可进而激活NF-κB、MCP-1、ICAM-1、TNF-a炎症因子及Notch1下游基因的表达。这一发现为后续研究提供了基础。综上所述，本研究结果提示EGCG降低尿酸所致的血管内皮细胞炎症及氧化损伤，为临床高尿酸血症及其相关疾病的防治提供了新的策略。