槲皮素透膜保护肾脏非沉积高尿酸血症血管平滑肌细胞损伤机制的研究

课题将采用分子生物学技术，开展槲皮素透膜转运对肾脏非沉积高尿酸血症鼠血管平滑肌细胞保护作用机制的研究。研究高尿酸血症在肾脏非沉积时肾脏、肾血管、胸主动脉血管的损伤；阐明槲皮素是否透膜转入肾脏非沉积高尿酸血症血管平滑肌细胞内发挥其保护作用；揭示槲皮素透膜转运的途径与转运蛋白Bilitranslocase的相关性；探讨槲皮素与转运蛋白Bilitranslocase的相互调节作用；引入微流控芯片系统中的介电泳、电旋转、单细胞阻抗测试技术，开展槲皮素对肾脏非沉积高尿酸血症血管平滑肌细胞迁移、增殖的影响及槲皮素透膜入胞作用的研究。为高尿酸血症的诊治提供新的靶点；为槲皮素的应用提供更加广阔的前景；为Bilitranslocase在提高药物疗效、定向药物设计、增加药物向靶组织转运等方面的研发和推广奠定理论基础；对建立非损伤性方法测定体内组分与药物反应的新观念及新方法起到积极的促进作用。

传统的观念认为，高尿酸对肾脏损伤的始动因素为“尿酸盐肾脏沉积”作用，新近认为这个观念是不全面的。因为尿酸盐结晶沉积常为局部、甚至未能发现，难以解释弥漫性间质-小管病变，高尿酸血症对肾脏的损伤需要进一步研究探讨；目前临床治疗高血尿酸血症药物的诸多不良反应限制了其应用，中药槲皮素具有多种药理作用。本课题开展非沉积高尿酸血症肾脏损伤及其机制的研究；阐明槲皮素对肾脏非沉积高尿酸血症的保护作用及其机制。.　　 (一) 非沉积高尿酸血症大鼠模型的建立及评价.　　正常组、非肾脏沉积高尿酸血症组（氧嗪酸750mg/kg）、高尿酸血症沉积组（腺嘌呤+氧嗪酸），结果：非沉积、沉积组与对照组相比，肾损伤指标均升高且有肾脏损伤的病理改变。非沉积组肾脏内无尿酸盐沉积，沉积组内可见尿酸盐结晶。提示成功建立了非沉积高尿酸血症大鼠模型，其氧嗪酸的阈值剂量为每日灌饲750mg/kg；非沉积高尿酸血症即可导致肾损伤。.　　(二) 非沉积性高尿酸血症致肾损伤氧化应激机制的研究.　　分组方法同前，检测肾组织血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA的表达及丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）。结果：非沉积组与对照组相比肾损伤指标均明显升高，血清和肾组织MDA含量明显增高、SOD明显降低，HO-1mRNA表达差异具有显著性。提示非沉积高尿酸血症导致肾损伤的机制与氧化应激密切相关。.　　(三) 槲皮素对非沉积高尿酸血症肾损伤的保护作用及其机制的研究.　　对照组、非沉积高尿酸血症组（氧嗪酸750mg/kg）、槲皮素组（氧嗪酸+槲皮素150mg/kg）。测定MDA、SOD及白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及病理研究。结果：非沉积组与对照组相比，肾损伤指标明显升高，肾组织及血清SOD活性明显降低、MDA含量明显增高，肾组织及血清IL-6和TNF-α水平均明显增高；槲皮素组与非沉积组比较肾损伤指标及病理损伤程度均明显降低，肾组织及血清SOD活性明显增高、MDA含量均明显降低，肾组织及血清IL-6和TNF-α水平均明显降低。提示槲皮素对非沉积高尿酸血症所致肾损伤具有保护作用；其保护作用与槲皮素的降尿酸、抗炎、抗氧化有关。.　　本课题研究揭示临床高尿酸血症应给予早期治疗，槲皮素对非沉积高尿酸血症肾损伤的保护作用为临床治疗高尿酸血症提供了新的药物选择。