CyPA-EMMPRIN相互作用与动脉粥样硬化及斑块稳定性的关系研究

It has been suggested that cyclophilin A (CyPA) and extracellular matrix metalloproteinase inducer (EMMPRIN) are involved in the formation of atherosclerosis (AS), with the expression of matrix metalloproteinases (MMPs). MMPs are important cytokines which can weaken the fibrous cap and induce the plaque rupture. Our previous study found that CyPA levels were closely related to the instability of coronary plaque. Moreover, the interaction of CyPA and EMMPRIN could stimulate monocytes to express some pro-inflammatory factors, including MMPs. Therefore, we presumed that both CyPA and EMMPRIN played important roles in the process of AS. CyPA-EMMPRIN interaction may accelerate the AS plaque formation and instability. Based on our preliminary studies, we will further demonstrate the roles of CyPA-EMMPRIN interaction in the regulation of AS plaque formation in this study. The gene knock-out mice model and cell model of monocyte will be used in the study. The over-expression or silence-expression of CyPA/EMMPRIN genes will be analyzed to verify the roles of CyPA-EMMPRIN interaction in AS plaque formation as well as in its downstream events.

研究提示亲环素A（CyPA）与细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)均参与动脉粥样硬化（AS）形成，并与基质金属蛋白酶（MMPs）的产生有关。MMPs是削弱纤维帽诱发斑块破裂的重要细胞因子。我们前期研究发现CyPA水平与冠脉斑块不稳定相关，并且CyPA-EMMPRIN相互作用能促进单核细胞的炎症反应，诱导MMPs等炎症因子生成。因此，推测：CyPA与EMMPRIN二者在AS斑块发展进程中发挥重要作用；CyPA-EMMPRIN相互作用可能加速AS斑块的形成和不稳定性。本研究拟在前期研究基础上通过基因敲除鼠模型，从整体水平研究CyPA-EMMPRIN相互作用在调控AS斑块形成中作用；同时以单核细胞株为模型进行机制研究，分别过表达和沉默表达CyPA/EMMPRIN，验证CyPA-EMMPRIN相互作用对AS斑块形成影响，以期阐明CyPA-EMMPRIN相互作用调控斑块形成及下游事件发生。

研究提示亲环素A（CyPA）在动脉粥样硬化（AS）发展进程中发挥重要作用，但是确切的机制尚不完全明确。基于我们前期研究发现CyPA与EMMPRIN的相互作用在单核细胞中的促炎症作用，拟进一步通过小鼠AS模型，内皮细胞及单核细胞株为细胞模型进行机制研究，以期阐明CyPA在调控斑块形成及下游事件发生中承上启下作用。.我们研究发现，CyPA可以诱导单核细胞的迁移趋化；促进单核细胞分泌炎症反应因子白介素6；CyPA通过MAPK-NF-кB炎症信号通路增强基质金属蛋白酶9的活性。.以人内皮细胞为模型发现：CyPA不仅具有促进内皮细胞凋亡，也具有抗内皮细胞凋亡功能，细胞外CyPA能激活内皮细胞Akt和NF-κB信号通路，继而引起内皮细胞抗凋亡基因Bcl-2表达上调，而应用小RNA干扰技术抑制细胞内CyPA后，细胞中促凋亡蛋白caspase-3表达被明显抑制。提示CyPA能在不同条件下促发内皮细胞的抗凋亡和促凋亡的双重作用，可能是动脉粥样硬化形成时内皮细胞功能发生改变的机制之一。.在C57BL/6J小鼠AS模型中发现：C57BL/6J小鼠形成AS斑块后，发现AS小鼠淋巴细胞内活性氧（ROS）水平和CyPA表达水平显著增加；体外应用anti-OX40特异性刺激OX40-OX40L轴后，淋巴细胞表达OX40及ROS水平显著上调，Anti-OX40L特异性阻断OX40-OX40L后，淋巴细胞OX40表达减少，细胞分泌ROS水平较刺激组降低；体外培养淋巴细胞，刺激组分泌的CyPA水平明显高于抑制组。研究提示OX40-OX40L通过调控CyPA表达升高促进AS斑块形成。.急性冠脉综合症（ACS）组患者外周CyPA水平明显高于稳定性心绞痛（SAP）组和非冠心病对照组，急性心肌梗死（AMI）组和不稳定心绞痛（UAP）组的外周血CyPA水平两组间比较差异无统计学意义，AMI组一周后CyPA水平明显低于其急性期。ACS组BNP、TnI均明显高于对照组，而LVEF值低于对照组，冠心病患者外周血CyPA水平的变化与其他血清学指标BNP、TnI等存在明显正相关，与LVEF存在明显负相关。外周血CyPA水平变化与冠心病患者的危险分层密切相关，可能可以用于预测冠心病患者急性心脏事件的发生。.该研究阐明了调控CyPA表达影响斑块形成及下游事件发生。阻断CyPA通路可能是防治AS的新靶点。